西 南 大 学
硕（博）士学位论文选题报告
学 号 112007326000002 姓 名 陈检锋 培养类别 全日制硕士研究生 学科专业 植物学 研究方向 植物生物学与生物技术 培养单位 农学与生物科技学院 指导教师 梁颖 教授
年 月 日
填 表 说 明
1、此表在指导教师指导下，由研究生填写。经开题报告公开论证会讨论通过，完清审核签
字手续后，提交培养单位一式两份。答辩前由培养单位报研究生院一份。
2、培养类别：(1) 全日制研究生；(2)高师硕士 ((3) 同等学力人员在职申请硕士学位。 2、培养单位：学生所属学院、所、中心 学位论文题目： 论文选题依据（包括国内外研究现状、选题的理论意义或实用价值、研究的特色及重要参考文献目录等） 油菜是世界食用植物油和植物蛋白的主要来源之一，也是我国重要的油料作物，占国内植物油料总产40%左右。冷害是油菜栽培中苗期常常遇到的一种灾害，它不仅会导致油菜的生长受到严重损害，甚至引起植株死亡，给生产带来严重的损失。研究冷害对油菜的伤害作用及其机理，探索植物抗寒机制及其预防措施，具有重要的理论和实际意义。 冷害是指由于温度的骤然降低，但仍处于零度以上，植株体内虽无结冰现象，但能引起各种生理障碍，主要表现在分段结实，落花落果，产量下降。以往的研究表明，作物的抗冷是一个复杂的由多基因控制的性状。在油菜的冷害研究上,引起冷害的原因有很多，常见的有：低温引起的冷害；干旱或渍水引起的冷害；移栽质量和弱苗引起的冷害；早抽薹引起的冷害，等等。 目前，对冷害的机理研究具有了较一致的认识。主要包括以下几个方面：（1）膜脂发生相变。低温下，生物膜的脂类会出现相分离和相变，使液晶态变为凝胶态。随着温度的下降，高熔点的脂质分子从流动性高的液晶态移动到凝胶态，液晶相和凝胶相间出现了裂缝。（2）膜的结构改变。在缓慢降温条件下，由于膜脂的固化使得膜结构紧缩，降低了膜对水和溶质的透性；在寒流突然来临的情况下，由于膜脂的不对称性，膜体紧缩不匀而出现断裂，因而会造成膜的破损渗漏，胞内溶质外流。（3）代谢紊乱。生物膜结构的破坏会引起植物体内新陈代谢的紊乱。如低温下光合与呼吸速率改变不但使植物处于饥饿状态，而且还使有毒物质(如乙醇)在细胞内积累，导致细胞和组织受伤或死亡。 虽然对油菜冷害机理进行了较一致的研究，但对油菜抗冷性的研究还较少，这方面的研究主要包括冷害对油菜各生理指标的影响、油菜冷害诱抗剂的研究以及油菜抗冷相关基因的研究三个方面。 宋良图(1992)研究了甘蓝型油菜杭寒性的形态生理学基础, 分析了抗寒性与若干影响因子之问的关系, 并用数学分析方法综合评价抗寒性, 以确定有关因子对抗寒性的相对重要性。结果表明,甘蓝型油菜的抗寒性与外界温度最低气温相关密切, 它主要通过对抗寒性生理基础的影响来实现的。在这些生理因子中, 水分状况尤其是自由水和束缚水含量与抗寒性关系密切, 其次是细胞汁浓度和可溶性糖含量。光合作用和呼吸作用也与抗寒性有关。胡胜武等（1994）对甘蓝型油菜杭寒性的李节变化及其同某些渗透物质的关系进行了研究。结果表明, 甘蓝型油菜抗寒性的季节变化分为抗寒性锻炼、抗寒性保持和抗寒性消解三个阶段, 在抗寒性保持阶段, 不同品种抗寒能力差异显著。在越冬期中, 叶片中可溶性糖含量、细胞汁液浓度、游离氨基酸、游离脯氨酸含量上升, 总含水量、自由水含量下降, 束缚水含量以及束缚水/自由水比值上升。M. RAPACZ(2002)研究认为甘蓝型油菜对抗冷性的忍耐力取决于低温的锻炼。盖玥等（2005）研究了零上低温处理对白菜型油菜品种抗寒生理指标的影响，结果表明，在10 ℃以下，各品种伴随着叶片含水量的下降，丙二醛（MDA）含量和膜透性显著增加，可溶性糖和游离脯氨酸含量急剧上升，其中876、天油2 号、渭原冬油菜表现出较强的抗寒性，相关分析结果表明，总含水量和可溶性糖含量与越冬存活率关系密切。李世成（2007）等研究认为，随着温度的降低,各品种叶片的含水量下降, 细胞膜相对透性和丙二醛(MDA) 含量增加, 可溶性糖和游离脯氨酸含量上升, 其中4 个品种(系) 表现出较强的抗寒性,2 个品种(系) 的抗寒性则相对较弱。相关分析结果表明: 细胞膜相对透性和可溶性糖含量与甘蓝型油菜品种抗寒性的关系最为密切。朱顶目（2007）研究冻害与裂茎的关系, 结果表明裂茎植株的裂口数量、形态、密度及裂口的恢复程度与叶片生长、株高生长速度、花蕾发育未见明显异常, 而植株的倒伏明显增加。 对于冷害诱抗剂的研究，吴庆生等（1995）研究认为黄腐酸可增强油菜幼苗超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（Cat）活性和提高抗坏血酸含量，抑制了丙二醛（MDA）的产生，减少电解质渗漏，减轻叶绿素的破坏，维护细胞的生理功能，光合速率和根系活力增加，呼吸速率明显降低。杨建新等（1994）研究表明用0.05μl/ml烯效唑浸油菜种子，能阻止其幼苗4℃，36h低温胁迫下的细胞膜电解质渗漏，提高SOD，CAT活性和游离脯氨酸、可溶性蛋白质以及Vc含量，降低MDA含量和减缓低温对幼苗叶绿素的破坏。刘爱荣等（2002）通过用不同浓度梯度的精胺(Spm ) 和亚精胺(Spd) 对油菜种子浸种和蕾薹期喷施, 试验结果表明：外源多胺能够被植物吸收, 且能提高植物抗性。各处理与对照相比,MDA 含量降低, 电导率减小, Proline 含量升高, SOD 和POD 活性均增加。王煜等（1997）通过SOD 模型化合物研究油菜幼苗抗寒性，证实SODMC 处理幼苗可在一定程度上提高油菜幼苗的抗寒性, 减轻低温胁迫对膜的损伤。王春利等（2001）研究认为0.10 êCl2 可增加根粗、根长、根鲜重、地上部鲜重及根冠比，有利于植株形成壮苗，增强油菜抗寒性。周琴等（2007）研究了6-BA 和PP333对油菜幼苗抗寒性的影响，结果表明，在一定范围内，提高6-BA 和PP333浓度可以提高油菜幼苗单株重，降低离体叶片电导率和游离氨基酸的渗出率，一定浓度的62BA 和PP333可提高叶片膜系统保护酶活性, 降低叶片膜脂过氧化程度，改善根系活力，从而增强油菜的抗寒性。目前冷害诱抗剂的研究主要集中在单一诱抗剂对油菜抗冷性的影响，而没有对不同的诱抗剂进行比较分析。 至于抗冷相关基因的研究，国内外的研究都还较少。White（1993）克隆了甘蓝型油菜低温诱导基因BN115基因，研究发现这个基因在2℃时，在绿色组织中可诱导β-GUS酶的产生。 不管在是否存在ABA，在22 ℃ 下都不表达。Hawkins(1996)等研究认为BN28 是甘蓝型油菜中一个低温诱导的抗冷基因，PCR 和Southern 杂交表明 BN28 在甘蓝型，白菜型和芥菜型油菜中都有很好的多态性。另外，发现BN28基因的沉默导致低温条件下蛋白质表达量减少了。Kole（2002）等人通过QTL分析，发现与抗冷性相关的16个QTL位点中有6个存在于多个世代中。陈军锋（2007）采用RACE 技术克隆获得1 条新的抗冷相关基因(Bn COR14) .序列分析表明BnCOR14 与拟南芥及荠菜等COR 蛋白具有较高的相似性,且BnCOR14 具有典型的LEA 蛋白序列特征，表明BnCOR14 可能在油菜抵抗冷胁迫的过程中具有重要的作用.Asghari (2008)研究表明，油菜F-3 家族中的 LT50 是一个抗冷性基因。由于抗冷过程是一个复杂的代谢调控过程，到目前还没有一致的认识。 基于与以上的研究现状，本人认为对冷胁迫蛋白质组方面的研究还很少，因此我提出了本项研究，目的是在研究清楚高效诱抗剂对油菜冷胁迫蛋白质组水平的变化，进而对研究诱抗剂提高油菜的抗冷性机理。 参考文献： [1] 胡胜武, 于澄宇, 王绥璋, 等. 甘蓝型油菜抗寒性的鉴定及相关性状的研究[J].中国油料作物学报, 1999, 21(2), 33～35. [2] 胡胜武,黄继英,徐爱遐,等. 甘蓝型油菜抗寒性的研究Ⅰ. 渗透调节与抗寒性的关系. 中国油料,1993(3) :1～4 [3] 胡胜武,黄继英,徐爱遐,等. 甘蓝型油菜抗寒性与某些渗透物质的关系. 西北农业学报,1994 ,3(1) :24～28 [4] 盖 玥，牛俊义，孙万仓. 降温处理对白菜型油菜品种抗寒生理指标的影响[J]. 甘肃农业大学学报, 2005,4(2),182 ～185. [5] 李世成, 牛俊义, 盖玥.零上低温处理对不同甘蓝型油菜品种抗寒性的影响[J].干旱地区农业研究,2007,25(6) ,40 ～ 44. [6] 朱顶目吴万秀.油菜冻害裂茎的观察初报[J]. 现代农业科技,2007,17,177. [7] M. RAPACZ. Cold-deacclimation of Oilseed Rape (Brassica napus var. oleifera) in Response to Fluctuating Temperatures and Photoperiod[J]. Annals of Botany, 2002, 89, 543 ～549. [8] Asghari, A., Mohammadi, S. A., Moghaddam ,et al. Analysis of quantitative trait loci associated with
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