大肠杆菌不产生或少产生2，3-丁二醇，VP反应阴性。
2．甲基红（M.R）反应
大肠杆菌产酸多，使pH降至4.2,
甲基红由黄变红，反应阳性。产气气杆菌产2，3-丁二醇，产酸少（pH5.3），甲基红反应阴性。
3．另外，甲酸只在碱性环境下积累（pH7.3）,而pH6.2以下，不产甲酸， HCOOH →
CO2+H2。甲酸脱氢酶与氢化酶联合作用。 伤寒杆菌无甲酸脱氢酶，只产酸不产气。 2节：分解代谢 一、淀粉的分解
淀粉有两类：一类是直链淀粉（α-1，4-糖苷键）；另一类是支链淀粉（支链α-1，4、分支点α-1，6-糖苷键）。
1、液化型淀粉酶（α-淀粉酶）：分子内α-1，4-糖苷键，不作用α-1，6-糖苷键以及靠近α-1，6-糖苷键的α-1，4-糖苷键。作用的结果是产生麦芽糖，含有6个葡萄糖单位的寡糖和带有支链的寡糖，使黏度下降。枯草杆菌通常用作α-淀粉酶的生产菌。
2、糖化型淀粉酶：这是一类酶的总称。共同特点是可以将淀粉水解成麦芽糖或葡萄糖，包括以下三种：
（1）淀粉-1，4-麦芽糖苷酶（β-淀粉酶）：从非还原性末端开始，按双糖为单位，逐步作用于α-1，4生成麦芽糖。但不作用于α-1，6，遇到α-1，6时，作用停止。作用于淀粉后的产物是麦芽糖与极限糊精。
（2）淀粉-1，4-葡萄糖糖苷酶（糖化酶）：
从非还原性末端开始，依次以葡萄糖为单位逐步作用于α-1，4，生成葡萄糖，但能越过α-1，6。根霉与曲霉普遍都能合成与分泌此酶。
（3）淀粉-1，6-葡萄糖苷酶（异淀粉酶）：此酶专门作用α-1，6-糖苷键。 二、纤维素与半纤维素的分解
纤维素是葡萄糖通过β-1，4-糖苷键连接，分子量更大，不溶于水，不能直接被人和动物消化，但它可以被许多真菌包括木霉、青霉、根霉以及放线菌与细菌中的一些菌株分解与利用
纤维素酶复合物：纤维二糖酶（β-葡萄糖苷酶），C1酶， Cx酶。 天然纤维素 C1酶 水合非结晶纤维素 Cx酶 纤维二糖+葡萄糖 纤维二糖酶
葡萄糖
细菌的纤维素酶位于细胞膜上，真菌和放线菌的纤维素酶是胞外酶。
自然界中纤维素丰富，对纤维素的研究早就成为重要的课题了。
在植物细胞壁还有半纤维素，包括各种聚戊糖与聚已糖，最常见的半纤维素是木聚糖。半纤维素容易被微生物分解，但由于半纤维素的组成类型很多，因而分解它们的酶也各不同。生产半纤维素酶的微生物主要有曲霉、根霉、木霉等。 三、果胶质的分解
果胶质是构成高等植物细胞间质的主要物质，主要由D-半乳糖醛酸通过α-1，4-糖苷键连接。
天然果胶质（原果胶）原果胶酶 水溶性果胶 果胶甲酯水解酶 果胶酸 果胶酸酶 半乳糖醛酸。
分解果胶的微生物主要是一些细菌和真菌，麻类植物沤浸脱胶技术就是为了利用
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果胶分解菌分解果胶的能力。
四、几丁质的分解
几丁质由N-乙酰葡萄糖胺通过β-1，4-糖苷键连接起来，含氮多糖。是真菌细胞壁和昆虫体壁的组成成分，一般生物都不能分解与利用，只有某些细菌和放线菌能分解与利用。
几丁质酶使几丁质水解生成几丁二糖，再通过几丁二糖酶进一步水解生成N-乙酰葡萄糖胺。
五、油脂的分解
油脂在脂肪酶（Lipase）的作用下，逐步被水解生成甘油与脂肪酸，脂肪酸通过β-氧化进行分解。脂肪酶一般广泛存在于真菌中。 六、烃类化合物的分解
烃类化合物是一类高度还原性的物质，在好氧条件下，可以被一些微生物分解，主要是假单胞菌、分枝杆菌、诺卡氏菌、某些酵母等。 1、甲烷氧化：
2、正烷烃氧化：
先烃化酶（单氧酶）、铁硫蛋白和铁硫蛋白-NADH2还原酶作用。 三种方式：a:末端甲基氧化， b:次末端亚甲基氧化， c:两端甲基氧化 ? 氧化。
3、芳香烃氧化
含苯环或联苯类化合物，在氧化过程中逐步被氧化生成儿茶酚或原儿茶酚。儿茶酚或原儿茶酸可以在苯环的邻位上或间位上被氧化打开，生成脂肪族化合物，再逐步分解成糖分解途径中的中间体物质，再按糖代谢的方式进行分解。
苯（联苯）→儿茶酚→开环（邻位、间位） →继续降解。 七、蛋白质的分解
蛋白酶（胞外） 肽酶（胞内） 蛋白质 肽 AA
一般真菌分解蛋白质的能力强，并能分解天然的蛋白质，而大多数细菌不能分解天然蛋白质，只能分解变性蛋白以及蛋白质的降解产物。 根据肽酶作用部位不同，分为氨肽酶（作用于有游离氨基端的肽键）；羧肽酶（作用于有游离羧基端的肽键）。
腐化 decay 和腐败 putrefaction 八、氨基酸的分解 1、脱氨作用
有机含氮化合物在微生物作用后放出氨的生物学过程中，通常称为氨化作用。 （1）氧化脱氨：氨基酸在有氧条件下脱氨，产生氨与α-酮酸，由氨基酸氧化酶催化。包括脱氨反应（酶促）与水解反应（非酶促）。
（2）还原脱氨作用：在无氧条件下进行，生成饱和脂肪酸和氨。 天冬氨酸 琥珀酸+NH3 （3）水解脱氨与减饱和脱氨： 氨基酸经水解产生羟酸与氨：
氨基酸+水 羟酸+ NH3
通过减饱和方式进行脱氨，生成不饱和脂肪酸和氨： 天冬氨酸 延胡索酸+ NH3
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（4）脱水脱氨：含羟基氨基酸（如丝氨酸）在脱水过程中脱氨。 Ser → 氨基丙烯酸 → 亚氨基丙酸 →丙酮酸 + NH3
H2O
（5） Stickland反应
某些专性厌氧细菌如梭状芽孢杆菌在厌氧条件下生长时，以一种氨基酸作为氢的供体，进行氧化脱氨，另一种氨基酸作氢的受体，进行还原脱氨，两者偶联进行氧化还原脱氨。这其中有ATP生成。这个反应被称为Stickland反应。
供氢体：Ala、Leu、Val、Ser、Phe、Cys、His、Asp、Glu。 受氢体：Gly、Pro、Hyp、Orn、Arg、Trp。 丙氨酸+2甘氨酸 3乙酸+3NH3 2、脱羧作用
通过氨基酸脱羧酶作用，生成有机胺和二氧化碳。有机氨在胺氧化酶作用下放出氨生成相应的醛，醛再氧化成有机酸，最后按脂肪酸β-氧化的方式分解。
氨基酸脱羧酶具有高度的专一性，基本上是一种氨基酸有一种脱羧酶来催化它的分解。
反应中放出的二氧化碳可以用微量测压计测定，因此可根据一定基质在一定时间内，被单位细胞作用后、产生二氧化碳的量来测定脱羧酶的酶活。另外，也可以分析样品中的氨基酸的含量。
二元AA生成的二胺有毒。Lys-尸胺，Orn-腐胺 鉴定反应
吲哚实验与硫化氢实验是常用的两个鉴定实验 1、吲哚实验：有些细菌可以分解色氨酸生成吲哚可以与二甲基氨基苯甲醛反应生成红色的玫瑰吲哚，因此可根据细菌能否分解色氨酸产生吲哚来鉴定菌种。
2、硫化氢实验：许多细菌能分解含硫氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸）产生硫化氢，如果在蛋白胨培养基中加进重金属盐，接种细菌培养后观察，若产生硫化氢，则出现黑色的硫化铅或硫化铁。
3节：合成代谢 一、生物合成三要素
能量 、还原力、 小分子前体物
1、能量由ATP供给，ATP产生有三种方式（底物水平磷酸化，氧化磷酸化，光合磷酸化）
2、还原力产生：还原力主要指NADH2 和NADPH2 EMP 与TCA 产生的NADH2有3个去向： 1）供H体（中间产物还原成发酵产物）； 2）通过呼吸链产生ATP；
3）用于细胞物质合成。
但NADH2要先在转氢酶作用下转变成NADPH2才能用。 NADP+ NADH2 NADPH2+NAD
在体内还有HMP供给NADPH2与磷酸糖 。 1G 2 NADPH2+CO2+5-P-核酮糖
NADPH2在光细菌中可通过非环式光合磷酸化方式产生。
3、小分子前体物：通常指糖代谢过程中产生的中间代谢物，有12 种。 代谢回补顺序
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1、合成草酰乙酸（OA）回补顺序
PEP+CO2 羧化酶 OA+Pi
PY+CO2+ATP 羧化酶 OA+ADP+Pi PEP+CO2+GDP 羧化激酶 OA+GTP
PY+CO2+NADH2 苹果酸酶 苹果酸+NAD
á-KD+CO2+NADH2 脱氢酶 异柠檬酸+NAD
好氧性，利用乙酸微生物，以乙醛酸循环补充草酰乙酸。 2、合成PEP的回补顺序
PY+ATP PEP合酶 PEP+ADP+Pi PY+ATP+Pi PY双激酶 PEP+AMP+Ppi OA+GTP PEP羧激酶 PEP+GDP+CO2 OA+PPi PEP羧转磷酸酶 PEP+Pi+CO2 综合总结： 二、糖类合成
（一）单糖合成
1、卡尔文环Calvin cycle（光合菌、某些自养菌） （还原的磷酸戊糖环）分为三个阶段：
①CO2固定②固定CO2的还原③CO2受体的再生。 关键酶：1，5-二磷酸核酮糖羧化酶、磷酸核酮糖激酶。 总反应式：
6CO2+6H2O+18ATP+12NADPH2 G+18ADP+12NADP+18Pi
另外，产甲烷细菌有厌氧乙酰辅酶A途径，少数光合细菌中有还原性TCA途径等新的自养CO2固定途径。 2、EMP逆过程。 3、糖异生作用。
4、糖互变作用：大量是在核苷二磷酸糖水平上进行。 （二）多糖合成
E.coli肽聚糖合成：需1个多糖引物。
1、单糖组分在细胞质中合成(UDP是第一个载体） 2、逐步加上AA生成UDP-NAM-五肽（Park 核苷酸），顺序为L-Lys, D-Glu, DAP, D-Ala,
D-Ala ( 不需tRNA参与）。其中，2D-Ala D-丙酰-D-Ala(青霉素类似） 此阶段在细胞质中进行。
3、 UDP-NAM-五肽转至膜上，与一脂质载体（细菌萜醇
-C55类异戊二烯醇）结合，释放出NAM-五肽焦磷脂，在膜内侧与UDP-NAG结合，构成肽聚糖亚单位。
细菌萜醇是第二个载体。
4、亚单位转移至细胞壁的生长点上（插入），万古霉素、杆菌肽抑制。
5、在细胞膜外侧，亚单位与引物相连（转糖基作用），再通过转肽酶作用，将亚单位末端的D-丙-D-丙拆开，第四个AA与另一亚单位的DAP之间交联，另一D-Ala释放。 在这一步，由于青霉素是D-丙-D-丙的结构类似物，则转肽酶被抑制，造成肽链间无法交联，网状结构也连不起来，形成 \软壁
\，极易破裂死亡。青霉素只对正生长菌起作用，对静息细胞无作用。 、氮类物质合成
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