4040半自动生化分析仪检测ALT性能验证及评估
作者 韩海波 辽宁省血液中心
关键词 4040半自动生化分析仪 性能验证
摘要：目的：评价4040半自动生化分析仪检测ALT性能。方法：对我科于2014年1月至2月采集的87份无偿献血者初筛检验样本同时使用4040半自动生化析仪及检验科TBA120FR全自动生化分析仪检测ALT，并对其正确度、精密度、检测可报告范围及正常值参考范围等指标进行实验验证及评估。结果: 准确度：两种方法t值=1.053，P>0.05 r2=0.998
《血站技术操作规程》规定在献血前对献血者进行丙氨酸氨基转移酶（ALT）进行筛查，由于街头采血环境影响稳定性较差， 如何评价ALT初筛设备的准确性一直是难点，笔者通过对我单位使用的4040半自动生化分析仪检测结果进行分析，从而对其性能进行验证。
1材料与方法
1.1 仪器：4040半自动生化分析仪(德国RIELE公司产品，北京瑞尔达生物科技有限公司总销售)；TBA120FR全自动生化分析仪。
1.2 试剂：丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒(北京瑞尔达生物有限公司产品)速率法，试剂内未加磷酸吡哆醛。
1.3 标本采集及保存：采集空腹静脉血5.0ml，8小时内分离标本。
1.4校准物及质控物：校准血清(Roche, ALT校准值97.4U/L， LOT:159109，) 及质控血清 ( 康彻维坦公司，ALT低值血清靶值28.0 U/L，ALT高值血清靶值114U/L)
1.5 操作方法：4040半自动生化分析仪，仪器试验温度为37℃，试剂量0.25ml，标本量0.02ml，F=-2143，延迟时间1分钟，测定时间1分钟。全自动生化分析仪按说明书操作。
1.6 统计学分析：采用SPSS13.0统计软件进行数据处理，根据NCCLS文件EP-5、EP-6P进行线性回归计算、相关系数、t检验、标准差、变异系数等指标计算。
2 结果 2.1 正确度估计
4040半自动生化分析仪正确度估计我们采用与全自动生化分析仪比对方法，用Roche校准血清校准仪器，检测质控血清控制每批实验。取87份血清标本其中15例标本ALT≥50 U/L，72例标本ALT<50 U/L。每份标本分别用全自动生化分析仪(参考方法)为X与4040半自动生化分析仪(比较方法)为Y测定，，以参考方法所有结果为x值，
比较方法所有结果为y值，X均值=63.5U/L，y均值=64.3U/L，t值=1.053，P>0.05，线性回归y=0.990x+1.439，r2=0.998 。
质控血清测定，取二份定值质控血清(低值质控血请靶值28.U/L，高值质控血清靶值114U/L)用4040半自动生化分析测定结果分别为27U/L和111U/L，绝对误差分别为-1.0U/L和-3.0U/L，相对误差分别为3.51%和2.63%。
2.2精密度估计
批间重复性试验：取一份低值质控血清标本及一份高值高值血清标本，分别于1月2日至6日用4040半自动生化分析仪连续测定22次，其低值质控血清均值为27U/L，标准差1.36U/L，变异系数（CV％）5.00％，高值质控血清均值为111U/L，标准差5.10 U/L，变异系数（CV％）4.60％。
2.3 检测可报告范围
取一份低值(ALT＜30 U/L)外观澄清混合血清分为二份，其中一份为低值(L) 标本，另一份血清内添加ALT提取液，使血清ALT＞600 U/L为高值(H) 标本，充分混匀后将L和H标本按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H比例混匀，形成6份ALT值不同的系列血清标本，然后每份标本重复测定4次，结果见图
图:检测可报告范围
3结论：实验表明4040半自动生化分析仪检测ALT正确度、精密度、检测可报告范围等指标与检验科TBA120FR全自动生化分析仪检测结果具有一致性。
4讨论
在做确认实验之前，对操作人员进行培训，实验标本数量、标本采集、保存、标本分析物浓度范围选择等对实验影响因素，尽量按照血站操作技术规程(2012版)要求操作。仪器用校准血清进行校准，实验过程由质控物控制。
按照血站操作技术规程(2012版)文件对检测ALT正确度指标性能验证标准
r2>0.950，本实验对87份血清标本用全自动生化分析仪和4040半自动生化分析仪分别检测ALT，其相关系数r2=0.998 。用全自动生化分析仪测定87份血清标本均值63.5U/L，用4040半自动生化分析仪测定均值64.3U/L，t值=1.053，，显示两组均值无显著差异(P>0.05)。测定低值质控血清相对误差3.51%;测定高值质控相对误差2.63%。结果表明4040半自动生化分析仪检测ALT正确度符合要求。
参照Westgard和Ceroblewski等提出高效检验对精密度要求，批内不精密度CV应小于CLIA允许误差的1/4，批间不精密度CV应小于CLIA允许误差的1/3。对于ALT实验，CLIA允许误差限值T±20%，因此ALT检测方法的批内不精密度CV应小于5%，批间不精密度CV应小于6.7% 。本实验于1月2日至6日用4040半自动生化分析仪分别重复测定ALT 22次，低值质控血清批间不精密度5.00％，高值质控血清批间不精密度4.60％，均小于6.70%，结果表明4040半自动生化分析仪检测ALT精密度符合要求。
用4040半自动生化分析仪检测ALT可报告范围高值上限600U/L。4040半自动生化分析仪对无偿献血者在采血前检测(筛查)ALT≥50U/L可以控制在9.00％范围内，检验科全自动生化分析检测(复检)ALT≥50U/L可控制在0.50％范围内。 参考文献
[1] 中华人民共和国卫生部.血站操作技术规程[S].2012-02-24. [2] WS/T 407.1-2012《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》
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