A．将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 B．把氨基酸带到mRNA指定的位置上 C．增加氨基酸的有效浓度 D．将mRNA连接到核糖体上
19. 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的（ C ）活性极大地提高了DNA复制的保真度。
A. 5’ 3’外切酶活性 B. 5’ 3’内切酶活性 C. 3’ 5’外切酶活性 D. 3’ 5’内切酶活性 20. 血清蛋白乙酸纤维素膜电泳采用的染色剂是（ C ）
A. 茚三酮 B. 考马斯亮蓝G250 C. 氨基黑10B D. 考马斯亮蓝R250
四、 填空题（每空1分，共20分）
1. 蛋白质合成中掺入的第一个氨基酸是：___fMet__。 2. 碱基堆积力 是维持DNA二级结构的主要作用力。 3. 哺乳动物体内的必需脂肪酸是 亚油酸 和 亚麻酸 。 4. 血糖主要是指血液中所含的 葡萄糖 。
5. 酮体是指 乙酰乙酸 、 β-羟丁酸 和丙酮3种物质。 6. Met 和 Trp 只有一个密码子。
7. DNA复制过程中起消除引物作用的是 DNA聚合酶I 。
8. 细胞色素c 是以铁卟啉（血红素）为辅基的电子传递蛋白质的总称。 9. 考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后在 595 nm有最大光吸收。
10. 合成一分子软脂酸需要1分子 乙酰CoA ，7分子 丙二酸单酰CoA 。 11. 细菌mRNA在距起始密码子上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌
呤的序列，称为 SD序列 。
12. 大肠杆菌和其它细菌的DNA连接酶以 NAD+ 作为能量来源。 13. 碘乙酸可专一抑制糖酵解过程中 3-磷酸甘油醛脱氢酶 的活性。
O + 丙酮酸脱氢酶
14. CH3-C-COO-+CoASH+NAD
OH O O CH3-C-SCoA +CO2+NADH
O β-羟脂酰-ACP脱水酶
第5页
15. CH3-CH-CH2-C~SACP CH3-CH CH-C~SACP
O 乳酸脱氢酶
OH 16. CH3-C-COO-+NADH+H+ CH3-CH-COO- +NAD+
五、综合题（42分）
1. 简述同工酶的概念及电泳的概念。兔组织乳酸脱氢酶同工酶圆盘电泳的染
色原理是什么？（6分）
同工酶是指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质和免疫学性质不同的一组酶。（1.5分）
电泳是带点颗粒在电场作用下，向着与其电荷相反的电极移动的现象。（1.5分）
（3分）
2. 简述大肠杆菌DNA的转录过程。(6分) ① 模板的识别
RNA聚合酶在σ亚基引导下识别并结合到启动子上，然后DNA双链被局部解开，形成的解链区称为转录泡。（2分） ② 转录的起始
当形成新RNA的第一个磷酸二酯键后，σ亚基即由全酶中解离出来，由 核心酶继续进行转录。合成的RNA链的第一个核苷酸通常是pppG或pppA。（2分）
③ RNA链的延伸
核心酶沿DNA模板移动，按碱基互补配对原则，依次连接上核苷酸，使RNA链延伸。RNA链的延长方向是5’ 3’。（1分） ④ 转录的终止
第6页
当RNA聚合酶到达转录终止位点时，聚合反应停止，RNA链和聚合酶随之脱落，转录过程即告结束。（1分）
3. 按进入、转肽和移位三步简述大肠杆菌蛋白质合成过程中肽链的延伸阶
段。(7分) ① 进入
新进入的氨酰-tRNA上的反密码子必须与在A位点的mRNA上的密码子相互补。EF-Tu先与GTP结合，再与氨酰-tRNA结合，形成一个复合物（氨酰-tRNA-EF-Tu-GTP），然后这个复合物进入70S核糖体的A位点。随后GTP水解，EF-Tu-GDP从核糖体上解离下来。（2分） ② 转肽
进入A位点的氨酰-tRNA上的氨基与P位点上的肽酰-tRNA上的羧基之间形成一个新的肽键。该反应由肽酰转移酶催化。同时P位点上的tRNA卸下而成为无负载的tRNA，而A位点上的tRNA这时所携带的不再是一个氨基酸，而是一个二肽。（3分） ③ 移位
移位是指核糖体沿mRNA（5’ 3’）作相对移动。每次移动的距离为一个密码子的距离。移位的结果使原来在A位点上的肽酰-tRNA又回到了P位点上，原来在P位点上的无负载的tRNA离开核糖体。（2分）
4. 图1中，已知直线在横轴，纵轴截距分别为：－4，0.3；根据双倒数作图
法，求此酶的Km和Vmax。根据得到的米氏方程，求当底物浓度为3 mmol/L时的酶促反应速度v。(7分)
由双倒数作图法知：1/vmax=0.3，所以vmax=10/3 mol?L?min（1.5分）；-1/Km=-4，所以Km=0.25 mmol/L（1.5分）。
v=vmax?[S]/([S]+Km)(1分)=10/3?0.003/(0.003+0.00025)=3.08 mol?L-1?min-1（3分）
-1
-1
第7页
1.00.80.61/v0.40.20.0-4-2024-168101/[S](1/mmol.L)
图1
5. 图2是何种作用？该作用的意义是什么？试计算在该情况下1mol葡萄糖
彻底氧化产生的ATP数（写出计算过程）。（8分）
图2所示为苹果酸-天冬氨酸穿梭（1分）；该作用是将糖酵解产生的NADH运送入线粒体（2分）；
葡萄糖+2ATP+2ADP+2Pi+2NAD+ ——>2丙酮酸+4ATP+2NADH+2H++2H2O 丙酮酸+辅酶A+ NAD+ ——>乙酰CoA+NADH+CO2
乙酰CoA+3NAD++FAD+GDP+Pi+2H2O—>3NADH+FADH2+GTP+CoA+2CO2+3H+ 1NADH——>2.5 ATP；1FADH2——>1.5 ATP
总共：2+2*2.5+2*2.5+（3*2.5+1.5+1）*2= 32 ATP （5分）
第8页
图2
6. 试从以下几方面比较软脂酸的合成与β-氧化过程。（8分）
细胞中部位 酰基载体 转运机制 二碳片段 羧基 电子供体(受体) β-羟脂酰基构型 能量变化 第9页
合成 细胞质 ACP 三羧酸载体（乙酰-CoA） 丙二酸单酰CoA 最后形成 NADPH D型 消耗7个ATP，14NADPH β-氧化 线粒体 CoA 肉碱载体（脂酰-CoA） 乙酰CoA 首先失去 FAD、NAD+ L型 净产生106ATP
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