第一章
1.发酵工业产品类型 （1）.微生物菌体发酵 （2）.微生物酶发酵
（3）微生物代谢产物发酵 （4）.微生物转化发酵 （5）.基因工程发酵
（6）.动、植物细胞产物的发酵
？2.发酵的一般流程 液体深层发酵培养：
菌种---孢子制备----种子制备----发酵---发酵液预处理----提取精制-----成品检测----成品包装-
第二章
3菌种退化与变异原因（17） 1.遗传基因型的分离 2.自然突变的结果
3.经诱变剂处理后的退化变异
4.自然选育的流程图（18）（）略
5.DNA损伤修复的方式（19）
? 光复活作用 ? 切补修复 ? 重组修复
? SOS修复系统
? DNA多聚酶的校正作用
6.杂交育种的目的（33）
（1）使不同菌种的的遗传物质进行交换和重组从而改变原有菌株的遗传物质基础，获得杂种菌株
（2）把不同菌株的优良生产性能集中于重组体中，克服长期使用诱变剂处理造成的菌种生产活力下降等缺陷
（3）可以扩大变异范围，改变产品的质量和产量，甚至出现新的品种
（4）分析杂交结果，可以总结遗传物质的转移和传递规律，促进遗传学理论的发展
？7原生质融合制备过程（39）
① 标记菌株的筛选和稳定性验证。 ② 原生质体制备。
③ 等量原生质体加聚乙二醇促进融合。 ④ 涂布于再生培养基，再生出菌落。
⑤ 选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。 ⑥ 生产性能筛选。
第三章
8.配制工业发酵培养基的一般要求（52）
1.组成比较丰富，浓度恰当；
2.成分彼此间不能产生化学反应，稳定； 3.粘度适中，具有适当的渗透压；
4.利于主要产物的生物合成并能维持较长时间的最高生产速度，调节关系； 5.不影响通气与搅拌，又不影响分离； 6.经济易取。
9.生理酸性、碱性物质，迟效、速效氮源
（1）生理酸性物质：代谢后能产生酸性物质的营养成分。如：硫酸铵。
（2）生理碱性物质：代谢后能产生碱性物质的营养成分。如硝酸钠，乙酸钠等。
（3）速效氮源：经细胞吸收后可直接被利用的氮源，主要是氨基态或铵态的氮，前者如氨基酸和玉米浆，后者如硫酸铵。 （4）缓慢利用的氮源：经过微生物胞外酶的消化才能释放出氨基酸或NH4+的营养物质，如黄豆饼粉，花生饼粉，硝酸钠等。
10.影响培养基质量的因素（61） （1）原材料的质量 （2）水质
（3）灭菌的影响
糖类在高温条件下易被破坏，特别是还原糖与氨基酸、肽类或蛋白质等有机氮源一起加热时更易反应，形成棕色物质。糖类还可以与磷酸盐产生络合反应。 （4）pH的影响 （5）其他因素
第四章
11几种常用的灭菌方法及其基本原理（70） 化学物质灭菌：化学反应
辐射灭菌：紫外线与菌体核酸的光化学反应；其它射线使水分子产生自由基，强氧化性 干热灭菌：加速与温度有关的胞内反应 湿热灭菌：蒸汽释出潜热使蛋白不可逆变性 臭氧灭菌：氧化作用
过滤灭菌：过滤除去微生物
12湿热灭菌的原理，空消，实消 实消（实罐灭菌）：与培养基一起灭菌 空消（空罐灭菌）：连续发酵时，发酵罐需在培养基灭菌前进行灭菌
？13纤维介质除菌的机制（83）
惯性冲击：空气流速大时，起主导作用 拦截：空气流速小时，起主导作用 扩散：布朗运动
14经典空气过滤除菌工业流程的特点（84） 特点 ：
两次冷却、两次分油水、适当加热。空气第一次冷却到30～35℃，第二级冷却至20～25℃，经分水后加热到30～35℃，因为温度升高，相对湿度下降,可保证过滤介质不致受潮失效
15经典空气净化工艺流程图（85）图4-14 略
16无菌检查的方法（86） （1）肉汤培养法
（2）显微镜检查法(镜检法)
（3）平板划线培养或斜面培养检查法
？17染菌的原因及其处理 1）、种子带菌及其防治
防治（1）严格控制无菌室的污染
（2）在制备种子时对沙土管、斜面、三角瓶及摇瓶均严格进行管理 （3）对菌种培养基或器具进行严格的灭菌处理
（4）对每一级种子的培养物均应进行严格的无菌检查 2）空气带菌及其防治
过滤介质的选用和装填 过滤介质的灭菌和管理等 3）操作失误导致染菌及其防治
淀粉质原料，在升温过快或混合不均匀时容易结块，使团块中心部位“夹生” 。
灭菌时由于操作不合理，未将罐内的空气完全排除，造成压力表显示“假压”，使罐内温度与压力表指示的不对应。
泡沫染菌。
移种时或发酵过程罐内压力跌零 4）设备渗漏或“死角”造成的染菌 5）噬菌体污染及其防治
⑴ 并罐法
⑵ 轮换使用菌种或使用抗性菌株 ⑶ 放罐重消法 ⑷ 罐内灭噬菌体法
当噬菌体污染情况严重，上述方法无法解决时，应调换菌种，或停产全面消毒，待空间和环境噬菌体密度下降后，再恢复生产
18.制服染菌的要点 人＋物 1 操作人员
2 对空气净化系统的要求 洁净度
3 对蒸汽的要求 蒸汽的质量（稳定、活蒸汽) 4 对设备的要求 无渗漏、死角 5 对无菌室的要求 万级
6 对工艺操作的要求 严格执行工艺规程要求
第五章
18种子制备的一般过程（93）
摇瓶种子制备 种子罐种子制备
19影响种子质量的因素（96）
（1）培养基 （2）培养条件 （3）种龄 （4）接种量
20菌种保藏的目的与原理（99） 目的：创造休眠环境
原理：主要是根据菌种的生理生化特点人工创造条件使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异。
第六章
21摄氧率，呼吸强度（104）
微生物的耗氧量可用两个物理量表示： 1.摄氧率（γ）
单位体积培养液每小时消耗氧的量,单位为mmol(O2)/(L?h)。 2.呼吸强度（QO2）
单位重量的菌体（折干）每小时消耗氧的量，单位为mmol(O2)/g(干菌体)?h。 亦称为氧比消耗速率。
22氧的传递方程式（109）
N = KLa?(C*-CL)
式中，N 氧的传递速率，mmol O2/L?h
C* 溶液中溶氧饱和浓度，mmol O2/L CL 溶液主流中的溶氧浓度， mmol O2/L
KLa 液相体积氧传递系数，又称通气效率， 单位为1/h
23摄氧率的测定（118） 用复膜氧电极停气法测定。
单位电流值代表的溶氧浓度=C*/(i饱-i残) 其中， C* ： 饱和溶氧浓度，mmolO2/L
i饱 ：在饱和溶氧浓度时的电流值，mV
i残 ：残余电流，在溶氧浓度为零时的电流值，mV 标定后的电极便可用于测定。 某一发酵时间的菌体摄氧率： r = C*/(i饱-i残)?(-?i/?t)
?t 停止供气后溶氧浓度下降至最低点所用的时间，h ?i 在?t 时间内电流的变化值，mV
第七章
24微生物发酵类型（121
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