第二十章弧菌科及检验

第二十章 弧菌科及检验

本章考点： 1.概述 2.弧菌属：分类、生物学性状、临床意义、微生物检测方法 3.气单胞菌属 4.邻单胞菌属

弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。

弧菌科包括4个菌属，即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。前三属细菌均可引起人类感染，发光杆菌属对人无致病性。

一、弧菌属

弧菌属的细菌分布广泛，以水中最多。

世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类： ①O1群霍乱弧菌；

②不典型01群霍乱弧菌； ③非01群霍乱弧菌；

④其他弧菌（副溶血性弧菌）。

对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。 （一）霍乱弧菌

霍乱弧菌是霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。

1.生物学特性

（1）形态染色：本菌呈弧形或逗点状，无芽胞，有菌毛，有些菌株有荚膜。一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。 （2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。耐碱不耐酸。可在无盐环境生长。

碱性蛋白胨水中，经35℃培养6～9h，在液体表面大量繁殖形成菌膜，可达快速增菌的目的。碱性琼脂平板上，经培养18～24h，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）上，形成较大黄色菌落。 含亚碲酸钾琼脂平板上，因还原亚碲酸钾成金属碲，使菌落中心呈灰褐色。

庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。

（3）生化反应：能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。

（4）抗原结构与分型：霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。H抗原为弧菌属所共有，特异性低。O抗原特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。

（5）变异性：有形态变异、菌落变异、溶血性变异和毒力变异。

（6）抵抗力：本属菌对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。但耐碱力较强。

本章练习题：

关于霍乱弧菌，下列哪些说法是正确的

A.O1群有古典生物型和EI-Tor生物型之分

B.多粘菌素B敏感试验可用于古典生物型和El-Tor生物型的鉴别

C.部分菌对庆大霉素敏感

D.营养要求高，在普通营养琼脂上生长不好

E.感染途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入 [答疑编号500729200101：针对该题提问]

『正确答案』ABE

2.微生物学检验

（1）标本采集：标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。可用无菌棉拭子采取自然排出的新鲜粪便，亦可用直肠拭子由肛门插入直肠3～5cm处采集。一般米泔水样便采取1～3ml，成形便采取蚕豆大小。

采集的标本应及时接种适宜培养基。不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。常用的保存或运送培养基有碱性蛋白胨水、文-腊二氏保存液和卡-布运送培养基等。

（2）检验方法及鉴定

表5-20-1霍乱弧菌两个生物型的鉴别

性状 古典型 EITor型 溶血（羊红细胞） - D

血凝（鸡红细胞） - + VIP试验 - + 多粘菌素B敏感试验 + - 噬菌体IV组裂解 + - 噬菌体V组裂解 - + 3.临床意义

致病物质：霍乱肠毒素，鞭毛，菌毛等。

所致疾病：霍乱。表现为剧烈的腹泻和呕吐，导致严重脱水、代谢性酸中毒、休克

和死亡。

免疫性：霍乱病后可获得牢固的免疫力，再感染者少见。小肠内有sIgA形成。 （二）0139型霍乱弧菌

属非01群霍乱弧菌，可与0139抗血清凝集。

治疗原则：输液，纠正电解质紊乱，选用合适的抗菌药物。

（三）副溶血性弧菌

副溶血性弧菌是一种嗜盐性弧菌。常存在于近海岸海水、海产品及盐渍食品中。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。

食未煮熟的海产品后发生暴发性食物中毒最可能由哪种细菌引起 A.鼠伤寒沙门菌 B.痢疾志贺菌 C.副溶血弧菌 D.霍乱弧菌 E.胎儿弯曲菌

[答疑编号500729200102：针对该题提问]

『正确答案』C

1.生物学特性

（1）形态染色：革兰阴性菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态。两极浓染。菌体一端有单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。

（2）培养特性：需氧，营养要求不高，在普通培养基中加入适量NaCl即能生长。NaCl最适浓度为35g／L，在无盐培养基中不生长。本菌不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。生长所需pH为7.0～9.5，最适pH为7.7。

在液体培养基表面形成菌膜。

在35g／LNaCl琼脂平板上呈蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明；

在副溶血性弧菌专用选择培养基上形成1～2.5mm，稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落；

在SS平板上不生长或长出1～2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈粘丝状。

在羊血琼脂平板上，形成2～3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成β溶血或α溶血。

在TCBS琼脂上不发酵蔗糖，菌落绿色。（与霍乱弧菌相区别） （3）生化反应：本菌在30g／L NaCl和 70g／LNaCl培养基中生长，在无盐或100g／L NaCl培养基中不生长。神奈川试验是致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对马红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。

2.微生物学检验

1）标本采集：主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。 2）检验方法及鉴定：①增菌培养：取标本0.5～1ml接种40g／L NaCl蛋白胨水中，37℃培养，若有本菌存在，一般数小时即出现明显混浊，即可分离培养；②分离培养：将标本或增菌培养物接种副溶血弧菌选择培养基35℃培养18～24h观察结果。菌落湿润、混浊无粘性，呈绿色；③鉴定：根据其形态、染色、多形性、活泼动力等特点，以及在选择培养基上的菌落特征，结合氧化酶试验阳性，在KIA上K/A， H2S（-）。在MIU上“ ++-”。以及嗜盐试验和血清学分型可作初步鉴定。 最后鉴定，必要时作进一步生化试验及毒力试验。

3.临床意义：致病因子有粘附因子（主要为菌毛）、毒素（如耐热性溶血素）。 所致疾病为食物中毒及急性胃肠炎，常为被污染的海产品及盐腌制品所引起，此菌尚可引起浅表创伤感染、败血症等。

4.治疗原则：选用合适的抗生素及其他抗菌药物，严重病例需输液及补充电解质。

二、气单胞菌属与邻单胞菌属 （一）气单胞菌属

气单胞菌属广泛分布于自然界，可从水源、土壤以及人的粪便中分离。本属细菌有