页 号 修改次数 审 核 人 标题 血液中乙醇的检测作业指导书 批 准 人 实施日期 1．目的
检测血液中乙醇含量。 2. 适用范围
本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。 3. 职责
第1页 共2页 第1次修改 技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。 4. 试剂与对照品
4.1 乙醇（色谱纯99%，Sigma）
4.2 乙醇溶液：精密称取乙醇1.0097g于100ml容量瓶内，添加蒸馏水至刻度，混匀，得10.00mg/ml乙醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至20倍，得0.50mg/ml乙醇控制液，放置样品室4℃冰箱保存，有效期为6个月。 4.3 叔丁醇（色谱纯99%，Chem Service）
4.4 内标叔丁醇溶液：精密称取叔丁醇0.5026g于100ml容量瓶内，添加蒸馏水至刻度，混匀，得5.00mg/ml叔丁醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至125倍，得40ug/ml叔丁醇内标工作液，放置样品室4℃冰箱保存，有效期为6个月。 4.5 乙醇标准溶液（Gerilliant）
乙醇标准溶液： 10mg/dl，20mg/dl，50mg/dl，80mg/dl，100mg/dl，200mg/dl，300mg/dl
5.血液中乙醇定性、定量的分析 5.1样品处理
用精密移液器取样品血0.10 mL及0.50 mL叔丁醇40μg/mL内标工作液2份，各加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，置于顶空自动进样器中加热10 min，待测。 5.2 气相色谱仪条件
色谱柱：DB-ALC1毛细管柱（30m?0.32mm?1.2?m） 柱温：恒温40?C
检测器：火焰离子化检测器（FID） 检测器温度：250?C 进样口温度：150?C 5.3顶空自动进样分析条件
DANI顶空自动进样器(配1mL定量进样环)工作条件：加热箱温度（Oven）65℃，定量环温度105℃，传输线温度（TR.Line）110℃，样品瓶加热平衡时间（Vial EQ.Time）10.0min，样品瓶加压时间（Pressuriz Time）0.10min，定量环充满时间（Loop Fill Time）0.10min，定量环平衡时间0.05min，进样时间（Inject Time）1.00min。 5.4记录
记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值，填入表中，并根据工作曲线定量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。 5.5定量结果评价
样品应同时平行测定两份，单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差（双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差）若不超过5％时（有凝血块的血样不超过10％），结果按两份样品结果的平均值计算，双样相对相差若超过5％时（有凝血块的血样超过10％），需要重新测定。
| C1- C2|
双样相对相差（%） = ????? ? 100
C
C1、C2 为两份样品平行定量测定的结果。
式中C为两份样品平行定量测定结果的平均值（C1+ C2）/ 2；
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