医院微生物室尿路感染病原体检验操作规程

医院微生物室尿路感染病原体检验操作规程

1．尿液培养常见病原菌

革兰阳性菌 革兰阴性菌 金黄色葡萄球菌 淋病奈瑟菌 肠球菌 大肠埃希菌 A群链球菌 变形杆菌 腐生葡萄球菌 肺炎克雷伯菌 表皮葡萄球菌 产气肠杆菌 结核分支杆菌 沙门菌种 铜绿假单胞菌 沙雷菌

2、标本收集

2.1、尿液标本的采集可采用多种方法：有中段尿采集法、膀胱穿刺法、肾盂尿采集法，而常规是取中段尿作细菌培养。

2.2、取中段尿作培养时先要进行前尿道的清洗消毒，以免前尿道寄生菌群污染标本。

2.3、如采用其他方法收集标本，必须由临床医生根据临床诊断需要而执行收集术，并在检验单上写明。

3、检验步骤： 3.1、涂片检查

3.1.1、一般细菌及淋病奈瑟菌涂片：以无菌操作吸取尿液

10ml，3000r/min离心15min，去上清液，取沉淀涂片，革兰氏染色镜检，作初步报告。如查见革兰氏阴性双球菌，呈肾形位于细胞内或细胞外，报告“找到革兰阴性双球菌，存在于细胞内外，形似淋病奈瑟菌”。如未查见上述细菌可报告“未发现革兰阴性双球菌”。

3.1.2、念珠菌涂片：取尿液沉淀物放于清洁玻片上，覆以盖玻片，制成涂片，用高倍镜检查。革兰染色后，如发现发亮的芽生孢子和假菌丝，就可报告“霉菌孢子及菌丝”。

3.1.3、结核分枝杆菌：取尿液10ml，4000r/min离心沉淀30min，取沉淀物涂片，抗酸染色，镜检。如找到红色杆菌，可报告“发现抗酸杆菌”。

3.2、一般细菌培养(细菌计数)：用定量接种环取尿液10 u l接种血平板，35℃培养18～24小时，观察有无细菌生长，并计数菌落数，乘以1000，求出每毫升尿液的菌落数。根据菌落特征、涂片染色结果，选择相应的鉴定试条及药敏试条进行鉴定和药敏试验，如培养48小时无菌生长，即报告“无菌生长”。

3.3、特殊菌培养：淋病奈瑟菌培养，选用专用巧克力琼脂平板，接种后放入二氧化碳环境中培养。

4、结果报告：

4.1、尿液细菌培养检查必须报告细菌的种属、菌落计数(cfu/m1)及药敏结果。

4.2、革兰氏阴性菌落计数大于105cfu/ml，革兰氏阳性菌计数大于104cfu/ml，真菌大于103cfu/ml有诊断意义。

4.3、一般常规结核培养要8周方能报告。阳性结果可提前报告。但不做菌落计数只报告“抗酸杆菌生长，，的报告，如做了进一步的分型和鉴定，才能报告有××型结核杆菌生长。

4.4、用专用培养基培养淋球菌经鉴定可直接报告有淋球菌生长但不做菌落计数，如涂片发现细胞内或外有革兰氏阴性双球菌可报告“发现革兰阴性双球菌”。

4.5、如尿液培养同时有三种或以上细菌生长时，可视为污染标本，建议重留送检。

6、检验程序

尿 标 本

离心、沉淀涂片染色 （革兰及抗酸染色） 分离培养 直接药敏试验 （一级报告） （二级报告） 血平板、Mac

涂片染色镜检 纯培养

鉴定、药敏试条

最终报告 （三级报告）