方法1:点击Image,选择Save as PDF file,保存至filename.pdf。打开软件Adobe Illustrator CS6,文件---打开---选择刚刚保存的PDF文件。修改好之后,文件---导出---可以导出很多种类型的文件。一般选择保存成TIFF(.tif)文件,颜色模式选择RGB,勾选LZW压缩,其他默认。
方法2:点击Image,选择Copy to Clipboard。粘贴到Word中,右击进化树图片,编辑图片。即可更改字体字号。修改好可以了。或者进一步导出图片格式:先将该word文件打印生成PDF文件,再用Adobe Illustrator CS6或Adobe Photoshop CS6导出图片格式。
Mega建树
虽然Clustal X可以构建系统树,但是结果比较粗放,现在一般很少用它构树,Mega因为操作简单,结果美观,很多研究者选择用它来建树。
(1) 首先用Clustal X进行序列比对,剪切后生成C: empjc-a.aln文件;(同上)
(2) 打开BioEdit程序,将目标文件格式转化为FASTA格式, File-Open- C: empjc-a.aln, File-Save As- C: emp jc-b.fas;
(3) 打开Mega程序,转化为mega格式并激活目标文件,
File-Convert To MEGA Format- C: emp jc-b.fas → C: emp jc-b.meg, 关闭Text Editor窗口-(Do you want to save your changes before closing?-Yes);
Click me to activate a data file- C: empjc-b.meg-OK- (Protein-coding nucleotide sequence data?-No); Phylogeny-Neighbor-Joining(NJ)
Distance Options-Models-Nucleotide: Kimura 2-parameter; √d: Transitions+Transversions; Include Sites-⊙Pairwise Deletion
Test of Phylogeny-⊙Bootstrap; Replications 1000; Random Seed 64238
OK;开始计算-得到结果;
(4) Image-Copy to Clipboard-粘贴至Word文档进行编辑。
此外,Subtree中提供了多个命令可以对生成的进化树进行编辑,Mega窗口左侧提供了很多快捷键方便使用;View中则给出了多个树型的模式。下面只介绍几种最常用的:
Subtree-Swap:任意相邻两个分支互换位置;
-Flip:所选分支翻转180度;
-Compress/Expand:合并/展开多个分支; -Root:定义外群;
View-Topology:只显示树的拓扑结构; -Tree/Branch Style:多种树型转换; -Options:关于树的诸多方面的改动。 3 、TREECON
打 开Clustal X,File-Load sequences-jc-a.aln,File-Save Sequence as?(Format-PHYLIP;Save from residue-1 to 末尾;Save sequence as : C: empjc.phy);
打开TREECON程序, (1) Distance estimation
点 击Distance estimation-Start distance estimation,打开上面保存的jc.phy文件,Sequence Type-Nuleic Acid Sequence,Sequence format-PHYLIP interleaved,Select ALL,OK;
Distance Estimation-Jukes&Cantor(or Kimura),Alignment
positions-All,Bootstrap analysis-Yes,Insertions&Deletions-Not taken into account,OK;
Bootstrap samples-1000,OK;运算,等待?? Finished-OK。
(2) Infer tree topology
点击Infer tree topology-Start inferring tree topology,Method-Neighbor-joining, Bootstrap analysis-Yes,OK.;运算,等待??
Finished-OK。
(3) Root unrooted trees
点击Root unrooted trees-Start rooting unrooted trees,Outgroup opition-single sequence(forced),Bootstrap analysis-Yes,OK;
Select Root-X89947,OK;运算,等待?? Finished-OK。
(4) Draw phylogenetic tree
点击Draw phylogenetic tree,File-Open-(new) tree,Show-Bootstrap values/ Distance scale。
File-Copy,粘贴至Word文档,编辑。
TREECON 的操作过程看起来似乎较MEGA烦琐,且运算速度明显不及MEGA,如果参数 选择一样,用它构建出来的系统树几乎和MEGA构建的完全一样,只在细节上,比如Bootstrap值二者在某些分支稍有不同。在参数选择方 面,TREECON和MEGA也有些不同,但总体上相差不大。
4、 PHYLIP
PHYLIP 是多个软件的压缩包,下载后双击则自动解压。当你解压后就会发现PHYLIP的 功能极其强大,主要包括五个方面的功能软件:i,DNA和蛋白质序列数据的分析软件。ii,序列数据转变成距离数据后,对距离数据分析的软件。 iii,对基因频率和连续的元素分析的软件。iv,把序列的每个碱基/氨基酸独立看待(碱基/氨基酸只有0和1的状态)时,对序列进行分析的软件。v,按 照DOLLO简约性算法对序列进行分析的软件。vi,绘制和修改进化树的软件。在此,主要对DNA序列分析和构建系统树的功能软件进行说明。
(1) 生成PHY格式文件
首 先用Clustal X等软件打开剪切后的序列文件C: empjc-a.aln另存为C: empjc.phy(使用File-Save Sequences As命令,Format项选“PHY”)。用BioEdit或记事本打开(2) 打开Phylip软件包里的SEQBOOT
seqboot.exe: can't find input file \ Please enter a new file name> C: empjc.phy 按路径输入刚才生成的 *.PHY文件,显示如下: Bootstrapping algorithm, version 3.6a3 Settings for this run:
D Sequence, Morph, Rest., Gene Freqs? Molecular sequences J Bootstrap, Jackknife, Permute, Rewrite? Bootstrap
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