无菌检验方法适用性试验方案

无菌检验方法适用性试验方案

目 录

1.概述 1.1试验背景

为保证无菌检验结果的准确可靠，当建立产品的无菌检查法时，应进行方法的适用性试验，以确认供试品在该实验条件下无抑菌活性或其抑菌活性可以忽略不计，所采用的方法适合于该产品的无菌检查。按照《中国药典》2015年版四部“通则1101无菌检查法”要求，检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，检查方法应进行重新试验。

根据2015年版药典及药品微生物实验室质量管理指导原则要求，检测环境由原来的为C级背景下局部A级空气单向流，在层流净化工作台下进行无菌检测，变更为在C级背景下，无菌检查ORABS隔离系统中进行无菌检测,且由原来的臭氧消毒，变更为臭氧+过氧化氢灭菌消毒；培养基发生变更：由培养真菌用的改良马丁培养基变更为胰酪大豆胨液体培养基，培养温度由23-28℃变更为20-25℃，现针对XXX注射液进行适用性试验，以证明所采用的方法适合该药品的无菌检查。 1.4方案说明

验证过程中严格按照经批准的方案规定的内容进行，若因特殊原因需要变更时，应填写方案变更申请及批准书，报试验领导小组批准。 2.确认目的

按照《中国药典》2015年版四部“通则1101无菌检查法”规定对小儿氨基酸注射液无菌检查方法进行试验，在现有检验程序、检测条件及培养条件下，对该供试品的适用性试验进行确认，证明所采用的方法适合该药品的无菌检查。

验证过程中应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证领导小组批准。 3.小组人员 4.风险评估 4.1风险等级标准

A.严重程度（S）：测定风险的潜在后果，分为以下四级： 评分 严重程度 描述 直接影响产品质量要素或工艺与质量数据的可靠性、完整性或4 关键 可追踪性，可能导致产品不能使用，直接影响GMP原则，危害生产区活动。 直接影响产品质量要素或工艺与质量数据的可靠性、完整性或3 高 可追踪性，可能导致产品召回或退回，未能符合一些GMP原则，可能引起检查或审计中产生偏差。 对产品或数据无相关影响，但间接影响产品质量要素或工艺与2 中（不重要的） 质量数据的可靠性、完整性或可追踪性，可能造成资源的严重浪费或对企业形象产生较坏影响。 对产品或数据无相关影响，但对产品质量要素或工艺与质量数1 低（可以忽略） 据的可靠性、完整性或可追踪性仍产生较小影响。 B.可能性程度(P)：测定风险产生的可能性，为建立统一基线，建立以下四个等级： 评分 4 3 2 1 可能性 极高 高 中 低 描述 极易发生，约一星期一次或者更频繁 偶尔发生，约一个月一次 很少发生，约一年一次 发生可能性极低，三年甚至更长时间都不大可能发生 C.检测能力（D）：在潜在风险造成危害前，检测发现的可能性，设为以下四个等级： 评分 4 3 2 1 检测能力 极低 低 中 高 描述 失败很可能被忽视，因此没有检测到（无检测机制，无人工或视觉校验） 不检测，但可能被发现，如：作为现场检查的审计 定期检测，如：常规的手动控制或分析可检测到错误 始终检测到，如：自动控制装置到位，故障报警或错误后无法下一流程操作 风险分析及评价：根据确定的风险标准对已经识别并分析的风险进行评价，即通过评价风险的严重性和可能性从而确认风险的等级。 质量风险优先级别评价标准如下：

RPN/严重程度 RPN＞16或S=4 8≤RPN≤16 风险级别 高等风险 中等风险 风险处理优先等级 高优先 优 先 RPN≤7 低等风险 忽 略 风险优先系数（RPN）计算：严重程度（S）×可能性程度(P)×检测能力（D）。 风险水平的划分： ① RPN>16 或严重程度=4

高风险水平：此为不可接受风险。必须尽快采用控制措施，通过提高可检测性及/或降低风 险产生的可能性来降低最终风险水平。验证应首先集中于确认已采用控制措施且持续执行。 由严重程度为4 导致的高风险水平，必须将其降低至RPN 最大=8。 ② 16≥RPN≥8

中等风险水平：此风险要求采用控制措施，通过提高可检测性及/或降低风险产生的可能性 来降低最终风险水平。所采用的措施可以是规程或技术措施，但均应经过验证。 ③ RPN≤7

低风险水平：此风险水平为可接受，无需采用额外的控制措施。 4.2风险的确认 无菌检查结果不成立 4.3 风险的分析及评价

4.4依据风险分析及评价结果需实施的确认项目 5.试验前准备 5.1文件确认 序号 1 2 3 4 5 6 文件/资料 编号 存放地点 检查人： 检查日期： 复核人： 复核日期： 5.2.仪器确认：

5.2.1确认检测设备已经检定并在有效期内使用。 5.2.2确认检测设备运行良好，且满足检测需要。

设备名称 型号 编号 检定有效期至 运行检查 智能集菌仪 培养箱 培养箱 检查人： 检查日期： 复核人： 复核日期： 5.3物料、培养基和冲洗液的确认

5.3.1确认物料、培养基是否在有效期内使用 5.3.2确认物料、培养基储存条件、性状符合要求。

品名（试验物料） 集菌培养器

品名（已配制培养基） 硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基 沙氏葡萄糖肉汤培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 0.9%无菌氯化钠溶液 0.05%（v/v）聚山梨酯80的无菌氯化钠溶液 胰酪大豆胨琼脂培养基 沙氏葡萄糖琼脂培养基 固体批号 厂家 配制日期 批号 有效期 规格 批号 有效期 生产厂家 5.3预培养及灵敏度实验检查

5.3.1确认培养基已经预培养实验，并预培养合格。 5.3.2确认培养基已经灵敏度试验检查，并合格。 预培养：胰酪大豆胨液体培养基见【XXXXXX】 硫乙醇酸盐流体培养基见【XXXXXX】 品名 胰酪大豆胨液体培养基 批号 培养日期 日 时---- 日 时 培养条件 操作人 结果判断