2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
目标导航 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。2.结合图2-24,归纳单克隆抗体的制备过程及应用。
重难点击 1.动物细胞融合的原理和方法。2.单克隆抗体的制备过程。 课堂导入
方式一:1970年,有两位科学家做了人—鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜的流动性。思考该如何实现人—鼠细胞的融合,动物细胞融合后还有什么用途呢?植物体细胞杂交可得到杂种植株,动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗?
方式二:“太空婚礼”
2002年12月30日,两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”是黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,两批新人同时在“产房”——电融合仪内孕育新生命。 请思考:
新人一的婚礼流程是怎样的?爱情结晶是什么? 新人二的婚礼流程又是怎样的?爱情结晶会是什么呢? 要想知道答案,就让我们一起来进入今天的课题吧!
一、动物细胞融合
1.概念:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称细胞杂交。 2.原理:细胞膜的流动性。 3.诱导融合的方法
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(1)物理、化学方法:与植物体细胞杂交相同,如聚乙二醇、电激等。 (2)生物方法:灭活的病毒。
灭活的病毒
4.过程:具有不同遗传信息的两个或多个细胞PEG――→杂交细胞。 、电激等5.结果:形成杂交细胞。
6.意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。如:利用动物细胞融合技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。 合作探究
1.关于动物细胞融合过程与结果的思考:
(1)融合处理后的细胞是否可以直接用于培养,为什么?
答案 不可以,还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合,不能保证所有的细胞都发生融合,形成的融合细胞也有多种,因此需要筛选。 (2)动物细胞融合完成的标志是什么?
答案 动物细胞融合完成的标志是来自不同细胞的两个或多个细胞核融合成一个细胞核。 (3)动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有何不同? 答案 动物细胞融合可用灭活的病毒进行诱导。 2.细胞融合技术与有性杂交相比有哪些优点?
答案 有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限。动物细胞融合则不同,它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障,从而能够按照人们的意愿,把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比
比较项目 原理 细胞融 合方法 诱导手段 结果 用途 意义 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性、细胞的全能性 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导 形成杂种植株 克服远缘杂交不亲和的障碍,扩展杂交亲本范围,培育新品种 动物细胞融合 细胞膜的流动性 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散后,诱导细胞融合 与植物体细胞杂交相比,还可用灭活的病毒诱导 形成杂种细胞,以生产细胞产品 制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等 突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能 2
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