1 、巴斯德
2、非细胞生物、细胞生物、原核生物、真核生物。 3、肽聚糖、
4、吸附、侵入、复制、装配、释放
5、基内菌丝、气生菌丝、孢子丝、基内菌丝 6、缓慢期、对数期、稳定期、衰亡期 7、碘液 乙醇、紫色、浅红色。
8.吸附、侵入与脱壳、生物合成、装配、释放 9高，低 三．选择题
1、B 2、A 3、A 4、C 5、B 6、C 7、C 8、B 9、C 10、B
四．判断改错题
1.错2.对3.错4.对5.错 五．问答题
1. 试述革兰氏染色的步骤及机理。
革兰氏染色的步骤： 结晶紫初染、碘液媒染、 95 ％乙醇脱色、红色染料复染 4 步 革兰氏染色的机制： 革兰氏染色结果的差异主要基于细菌细胞壁的构造和化学组分不同。通过初染和媒染，在细菌细胞膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。 G + 细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和交联紧密，故用乙醇洗脱时，肽聚糖层网孔会因脱水而明显收缩，再加上的 G + 细菌细胞壁基本上不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此，结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内，使其呈现蓝紫色。 G - 细菌因其细胞壁薄、肽聚糖含量低和交联松散，故遇乙醇后，肽聚糖层网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇将类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝，这样结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁。因此，通过乙醇脱色，细胞又呈现无色。这时，再经番红等红色染料复染，就使 G - 细菌获得了新的颜色 —— 红色，而 G + 细菌则仍呈蓝紫色（实为紫中带红）。
2.单细胞微生物典型生长曲线分为哪几个时期？其中第二个时期有何特点、处于此期的微生物有何应用？
单细胞微生物典型生长曲线 分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期 4
个时期。指数期的特点是：①生长速率常数 R 最大，因而细胞每分裂一次所需的时间——代时（ generation time ， G ，又称世代时间或增代时间）或原生质增加一倍所需的倍增时间最短；②细胞进行平衡生长，故菌体各部分的成分十分均匀；③酶系活跃，代谢旺盛。指数期的微生物具有整个群体的生理特性较一致、细胞各成分平衡增长和生长速率恒定等优点，是用作代谢、生理等研究的良好材料，是增殖噬菌体的最适宿主，也是发酵工业中用作种子的最佳材料。
3. 什么是缺壁细菌,试简述四类缺壁细菌的形成、特点及实践意义？ 答：细胞壁是细菌细胞的最基本构造,而缺壁细胞是指在自然界长期进化中或在实验室菌种的自发突变中发生缺细胞壁的细菌;此外在实验室中,还可用人为的方法抑制新生细胞壁的合成或对现成的细胞壁进行酶解而获得缺壁细菌. 缺壁细胞共有四类;
L-型细菌指细菌在特定条件下,由基因自发突变而形成的的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株,多形态,有的可通过细菌滤器而称过滤形细菌,在固体培养基上形成\油煎蛋似\的小菌落
原生质球是指在人为条件下,用溶菌酶去除革兰氏阴性细菌细胞壁或用青霉素抑制革兰氏阴性细菌新生细胞壁合成后残留着部分细胞壁而形成的细菌细胞,它呈圆球形
原生质体是指在人为条件下,用溶菌酶除尽应有的细胞壁或用青霉素抑制新合成的细胞壁后,所得到的仅有一层细胞膜裹着的圆球状渗透敏感细.一般由革兰氏阴性细菌形成
支原体是在长期进货过程中形成的,适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物.因它的细胞膜中含有一般原生物成没有的甾醇.所以即使缺乏细胞壁,其细胞膜仍有较高的机械强度.
上述原生质体的球状体的共同特点是:无完整的细胞壁,细胞呈球状,对渗透压极其敏感,革兰染色阴性,即使有鞭毛也无法运动,对相应噬菌体不敏感,细胞不能分裂,等等.当然,如在形成原生质体或球状体以前已有噬菌体浸入,它仍能正常复制,增殖和分裂;同样,如在形成原生质体以前正在形成芽孢,则该芽孢仍能正常形成.原生质体或球状体比正常有细胞壁的细菌更不容易导入外源遗传物质,故是研究遗传规律的进行原生质体育种的良好实验材料.
微生物学试题（四）答案：
5
一．翻译题（每个1分，共5分） 1.枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis 2.鞭毛 Flagella
3 .Actinomyces 放线菌 4．disinfection 消毒 5. continuous culture 连续培养
二.名词解释（每题 3分，共计 15分）
1.温和噬菌体：凡吸附并侵入细胞后，将噬菌体的DNA整合到宿主染色体组上并可长期随宿主DNA的复制而同步复制，因而在一般情况下不进行增殖和引起宿主细胞裂解的噬菌体称温和噬菌体。
2.高频重组菌株 该细胞的F质粒已从游离态转变为整合态,当与F- 菌株相接合时,发生基因重组的频率非常高.
3. 根圈：也称根际，指生长中的植物根系直接影响的土壤范围
4.芽孢：某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、壁厚 抗逆性强的休眠构造。
5. 基内菌丝：当孢子落在固体基质表面并发芽后，就不断伸长、分枝并以放射状向基质表面和内层扩展，形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝 三.选择题（每题 2分，共计 30 分） 1.下述不是磷壁酸的功能的是：A
A内毒素 B细胞壁抗原特异性
C 噬菌体的吸附位点 D 调节阳离子进出细胞 2. 下述细菌能通过细菌过滤器的是：C
A大肠杆菌 B 立克次氏体 C 支原体 D 分枝杆菌 3. 下述反应中那种物质被氧化：（B）
乙醛 + NA DH + H+ → 乙醇 + NAD+ A 乙醛 B NA DH C NAD+ D 乙醇
4. 通过有氧代谢，下述那个反应产生的ATP最多：B
A 葡萄糖 → 6-磷酸葡萄糖 B 葡萄糖 → 丙酮酸 C 琥珀酸 → 延胡索酸
.某生物在有氧和无氧时均可生长，并可利用氧，它属于：（D） A 微好氧 B好氧 C 厌氧 D 兼厌氧
5．一个细菌每10分钟繁殖一代，经1小时将会有多少个细菌：（A） A 64 B 32 C 9 D 1
6．下述那个时期细菌群体倍增时间最快 （C） A 稳定期 B 衰亡期 C 对数期 D 延滞期
7.下面关于连续培养的说法中，叙述不正确的是（ A ） A.恒化连续培养的控制对象是菌体密度
B.恒浊连续培养中微生物菌体以最高生长速率生长 C.恒化连续培养的产物是不同生长速率的菌体 D.恒浊连续培养无生长限制因子
8. 下列叙述中正确的说法是（ B ）
A.产生抗逆性强的芽孢是产芽孢细菌在不良环境条件下的一种生殖方式。
B.厌氧的微生物需要较低的氧化还原电位。
C.一种细菌的学名是Staphylococcus aureus,其中aureus属名，Staphyloccus是种名
D.类病毒是有侵染性的蛋白颗粒。 9.下述诱变剂中常引起移码突变的是：（D）
A 亚硝酸 B 烷化剂 C 碱基类似物 D 丫啶类染料 10.下述那个最可能产生一个重组细胞：（C）
A F+ x F- B Hfr x F+ C Hfr x F- D F+ x F- 11. 趋化性是指微生物能够 C
A 与土壤表面粘着 B 逃避噬菌作用 C 向化学刺激运动或避D 在不利条件下求生存
12. 用光学显微镜可辨别原核和真核细胞之间不同的是 D A 核糖体 B鞭毛 C细胞膜 D核
13、致病性革兰氏阴性细菌细胞壁组成中具有( C ) A.核心多糖 B.O-侧链 C.类脂A D.脂蛋白 14.鞭毛的化学组成主要是( C ) A.多糖 B.脂类 C.蛋白质 D.核酸 15. 质粒：D
A 与接合没有关系 B 和染色体同时复制 C 对生物的生存是必须的 D 通过接合可在细菌间转移 四.判断题（每个1分，共10分）
1. O-特异侧链决定G+菌细胞壁抗原特异性。（ 正确 ）
2. 芽孢形成过程中，芽孢衣形成在前，前芽孢形成在后（错误 ） 3.衣原体是古生菌。（ 错误 ）
6
4..放线菌的繁殖方式主要是芽殖。（ 错误 ）
5.一种细菌的学名是Staphylococcus aureus,其中aureus属名，是拉丁文的名词，Staphyloccus是种名，是拉丁文的形容词。（错误） 6发酵和呼吸一样都需要O2。（ 错误 ） 7..青霉素可抑制肽尾与肽桥间的转肽作用，从而杀死细菌。（ 错误 ） 8. 湿热灭菌时间要比干热灭菌时间短。（ 正确 ）
9. 微生物从一个细胞繁殖得到的后代称为该微生物的纯培养（正确） 10. 微波、超声波、紫外线都可用于杀菌。（正确）
五.问答题（1—4题每个5分，5—6题各10分，共40分） 1.简述配制培养基的原则和步骤
配制培养基的原则：①目的明确；②营养协调；③理化适宜；④经济节约。配制培养基的步骤：原料称量、溶解（加琼脂）→（过滤）→ 定容 → 调 pH → 分装→ 加棉塞、包扎 → 灭菌→（摆斜面）→无菌检查
2. 防止菌种衰退的措施有哪些？
① 控制菌种传代次数； ② 创造良好的培养条件； ③ 利用不易衰退的细胞移种传代； ④ 采用有效的菌种保藏方法； ⑤ 讲究菌种选育技术； ⑥ 定期进行分离纯化。 3. 青霉素抑制G＋的机理是什么。
答：青霉素抑制肽聚糖的合成过程，形成破裂的细胞壁，代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成，因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制：青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转态作用。 4.什么是质粒？其特点是什么？
质粒 是存在于细菌染色体外或附加于染色体上的遗传物质。其特点： ①绝大多数由共价闭合环状双螺旋 DNA 分子所构成，分子量较细菌染色体小。②每个菌体内有一个或几个，也可能有很多个质粒。③质粒可以从菌体内自行消失，也可通过物理化学手段，将其消除或抑制；没有质粒的细菌，可通过接合、转化或转导等方式，从具有质粒的细菌中获得，但不能自发产生。④质粒存在与否，无损于细菌生存。但是，许多次生代谢产物如抗生素、色素等的产生、以至芽孢的形成，均受质粒的控制。⑤质粒既能自我复制、稳定遗传，也可插入细菌染色体中或携带的外源 DNA 片段共同复制增殖；它可通过转化、转导或接合作用单独转移，也可携带着染色体片段一起转移。质粒已成为遗传工程中重要的运载工具之一。
5.微生物生长繁殖的主要方法及原理有哪些？ 答：（1）采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施成为灭菌，例如各种高温灭菌措施等。灭菌实质上是杀菌和溶菌两种，前者指菌体虽死，但形体尚存，后者则是菌体杀死后，其细胞发生溶化，消失现象。
（2）消毒 从字面意思看，消毒就的消除毒害，这里的毒害就是指传染源或者致病源的意思。所以，消毒是一种采用教温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病源菌，而对消毒的物体基本没害的措施。
（3）防腐 防腐就是利用某种理化因素完抑制霉菌微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的 措施，措施很多，主要由：低温。利用低于4度以下的低温以保藏食品，药品。 缺氧。采用密闭容器中加入除氧剂来有效的防止食品和粮食的霉变。变质，并达到保鲜的目的。干燥。采用晒干或红外线干燥等方法对粮食，食品等进行干燥保藏是最常见的防止霉变的方法。此外，在密闭条件下，用石灰，无水氯化钙，五氧化二磷，农硫酸，氢氧化钠也可达到食品药品和器材等长期防腐霉的目的。高渗。通过盐腌和糖渍措施来保存各种食物，是在民间流传已久的防腐方法。
(4)高酸度。 用高酸度也可达到到防腐的目的。泡菜是利用乳酸菌厌氧发酵使新鲜蔬菜产生大量乳品，借以达到抑制杂菌和长期保存的目的。 防腐剂。在有些食品。调味品，饮料和器材中，可以加入适量的防腐剂以达到防霉变的目的。如化妆品可加入山梨酸，脱氢醋酸等来防腐等。
6．细菌生长曲线分哪几个时期？各时期有何特征及在工业发酵中的应用。
延滞期,指数期,稳定期,衰亡期
（1） 延迟期：菌数没有增加，细胞大量合成细胞物质，准备分裂。生产上要尽量缩短该时期，如应用处于对数期的菌体接种，适当增大接种量，培养基成分尽量与种子培养基一致；
（2）对数期：菌数以指数增加。是研究微生物生理、遗传的好材料，是作菌种的好材料，是噬菌体的适当宿主；
(3)稳定期：菌体生长速度和死亡速度相等，菌体量达到最大。以培养菌体为目的时，可结束培养；开始积累次级代谢产物，以生产次级代谢产物为目的时，应通过调pH值，补加新鲜培养基等方式，延长该时期；
7
(4)衰亡期：菌数以指数下降。要及时放罐，避免菌体自溶，不利后处理。2．pH值对微生物生长有何影响？环境中的酸碱度通常以氢离子浓度的负对数即pH值来表示。环境中的pH值对微生物的生命活动影响很大，主要作用在于：引起细胞膜电荷的变化，从而影响了微生物对营养物质的吸收；影响代谢过程中酶的活性；改变生长环境中营养物质的可给性以及有害物质的毒性。每种微生物都有其最适pH值和一定的pH范围。在最适范围内酶活性最高，如果其他条件适合，微生物的生长速率也最高。大多数细菌、藻类和原生动物的最适pH为6.5-7.5，在pH 4-10之间也可以生长；放线菌一般在微碱性即pH7.5-8最适合；酵母菌、霉菌则适合于pH5-6的酸性环境，但生存范围在pH1.5-10之间。有些细菌甚至可在强酸性或强碱性环境中生活。微生物在基质中生长，代谢作用改变了基质中氢离子浓度。随着环境pH值的不断变化，微生物生长受阻，当超过最低或最高pH值时，将引起微生物的死亡。为了维持微生物生长过程中pH值的稳定，配制培养基时要注意调节pH值，而且往往还要加入缓冲物以保证pH在微生物生长繁殖过程中的相对稳定。强酸和强碱具有杀菌力。无机酸杀菌力虽强，但腐蚀性大。某些有机酸如苯甲酸可用做防腐剂。强碱可用作杀菌剂，但由于它们的毒性大，其用途局限于对排泄物及仓库、棚舍等环境的消毒。强碱对革兰氏阴性细菌与病毒比对革兰氏阳性细菌作用强。 微生物学试题（五）
一．翻译题（每个1分，共5分） 1.Staphylococcus aureusBacillus 2.LPS
3.Penicillium chrysogenum 4.disinfection 5.continuous culture
二.选择题（每题 2分，共计 40 分） 1.下列叙述中正确的说法是（ ）
A.好氧的微生物需要较高的氧化还原电位。
B.任何生物亲代与子代、子代与子代之间，无论在形态、结构、生理等方
面总会有差异，这些差异称为变异性。
C.放线菌的细胞构造和细胞壁化学组成与细菌相似，经革兰氏染色也
可分成G+ 菌和 G- 菌。
D.产生抗逆性强的芽孢是产芽孢细菌在不良环境条件下的一种生殖方式。
2.自然界氮素循环过程中，进行硝化作用和反硝化作用的微生物分别是（） A. 异养微生物和自养微生物 B. 都是自养微生物 C. 自养微生物和异养微生物 D. 都是异养微生物 3.沼气发酵中产甲烷细菌是( )
A. 专性厌氧菌 B. 兼性厌氧菌 C. 好氧菌 D. 微好氧菌 4.植物根系对根际微生物最大的影响是通过( )
A植物遮荫 B根系分泌各种有机物 C根系富集水分 D根系伸长过程式中造成土壤通气
5. 不同微生物在生长过程对pH的要求不同，放线菌对pH值的要求是（ ）
A. 偏碱性 B.中性 C. 偏酸性 D.酸碱都可 6.没有细胞壁的原核微生物是( )
A.立克次氏体 B.支原体 C.衣原体 D.螺旋体 7.G+细胞壁的主要化学成分有（ ）
A. 萄聚糖 B.脂多糖 C.几丁质 D.肽聚糖 8.制细菌标本片采取的制片方法是（ ）
A水浸片法 B. 涂片法 C. 印片法 D. 组织切片法 9.E.coli细菌的鞭毛着生位置是（ ）
A.偏端单生 B.两端单生 C.偏端丛生 D.周生鞭毛 10.细菌细胞的( )结构与其抗原性相关。 A.鞭毛 B.荚膜 C.芽孢 D.液泡
11．下列属于化能自养微生物的是 （ ）
A 亚硝化细菌 B 光合细菌 C 蓝细菌 D 霉菌
一个细菌每10分钟繁殖一代，经1小时将会有多少个细菌：（ ） A 64 B 32 C 9 D 1
12．下述那个时期细菌群体倍增时间最快 （ ） A 稳定期 B 衰亡期 C 对数期 D 延滞期 13.下列那种生物是兼厌氧菌：（ ）
A 好氧生长-，厌氧生长+，接触酶- B 好氧生长+，厌氧生长-，接触酶+
C 好氧生长+，厌氧生长+，接触酶+ D 好氧生长-，厌氧生长-，接触
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