HPLC法测定人参花茶和人参花红茶中13种人参皂苷含量

HPLC法测定人参花茶和人参花红茶中13种人参皂苷含量

董庆海1，王涵，曹莹1，杨录军2，崔宝仁3，王清2，刘金平1，李平亚1，王松2※

【摘 要】摘要：建立 HPLC 法同时测定人参花茶和人参花红茶中人参皂苷 Rg1、Re、Rh1、Rg2、Rb1、Rc、F1、Rb2、Rb3、Rd、Rg3、F2、CK 的含量。色谱柱：UnitaryC18（250 mm×4.6 mm，5 m）；流动相：乙腈-磷酸水，梯度洗脱；流速：1.3 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：203 nm。13 种皂苷在2 种茶中均被检出，在2 种样品中人参皂苷 Rd、Re、Rc、Rg2 的含量差异显著，人参花茶中人参皂苷Rd、Re、Rc 的含量高，人参花红茶中人参皂苷Rg2 的含量高。人参花茶和人参花红茶具有丰富的人参皂苷营养成分及功能因子，而且建立的检测方法简便快捷、精确度高、可靠性强，可用于人参花茶和人参花红茶中人参皂苷类成分的含量测定。 【期刊名称】《特产研究》 【年(卷),期】2019(041)003 【总页数】4

【关键词】高效液相色谱法；人参花茶；人参花红茶；人参皂苷；含量测定 【文献来源】https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_special-wild-economic-animal-plant-research_thesis/0201275486008.html

基金项目：国家质量基础共性技术研究与应用（2017YFF0211300）

人参（Panax ginseng C.A.Mey）为五加科人参属多年生草本植物，被《神农本草经》列为上品，有“百草之王”的美誉[1]，主要生长在我国东北地区[2]。人参花系人参未开放的花蕾，又名“神草花”，呈暗绿色，质脆，易碎，气香，

性温和，味甘微苦，有清热消炎、平肝清火、解毒利咽、降血压等功效，是天然的补品，素有“绿色黄金”之称[3-4]。每株人参仅开1 朵花，每年6月中旬左右人参花蕾才能孕育成熟，此时方可采摘[5]。近年来，随着对人参花研究的不断深入，发现人参花中人参皂苷的含量是根的5 倍[6]，参与调节机体的免疫网络，增强免疫力[7]，但不含Ro皂苷，服用不会使人上火[8]，挥发油含量也高于根、茎[9]，人参总多糖含量是根的2～5倍[5]，此外，人参花有其特有成分，人参花蕾9 肽和人参花蕾11 肽属于小分子，极易吸收，可快速准确地识别机体内的cAMP-cGMP平衡，使人体维持健康状态[10]。

通过人工采集人参花，经日晒、烘干、发酵等工艺，可制成人参花茶和人参花红茶，风味独特，营养价值极高，充分发挥了人参花的保健作用。人参花茶和人参花红茶作为一种新兴保健饮品，市场前景巨大，然而，在《中国药典》中只记载了人参根和人参叶的质量控制标准，并未见关于人参花及人参花茶的质量控制标准。因此，本研究应用HPLC 法建立了人参花茶和人参花红茶中13 种人参皂苷的定性、定量分析方法，旨在为其质量控制和评价提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

98-1-B 型电子调温电热套（天津市泰斯特仪器有限公司）；旋转蒸发仪（上海豫康科教仪器设备有限公司）；FA1104N 型电子分析天平（上海民桥精密科学仪器有限公司）；ACchrom S6000 型高效液相色谱仪（华谱新创科技有限公司）。 1.2 试药

乙腈（色谱纯，美国Fisher 试剂公司）；甲醇（分析纯，天津新通精细化工有

限公司）；磷酸（分析纯，北京化工厂）；纯净水（白山娃哈哈饮料有限公司）；人参皂苷Rg1、Rc、Rb2、Rb3、F1、F2、Rb1、Rh1对照品（吉林大学化学学院自制）；人参皂苷CK 对照品（中国药品生物制品检定所）；人参皂苷Re、Rg2、Rd、Rg3 对照品（吉林大学天然药物研究中心自制）。

人参花茶1 号、2 号、3号（生产日期为2018.12.10）和人参花红茶 4 号、5 号、6 号（生产日期 2019.01.10），均由吉林紫鑫药业提供。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

称取人参皂苷对照品适量，置于容量瓶中，加入甲醇溶解并定容，配制成Rg1（0.68mg/mL）、Re（0.74mg/mL）、Rh1（0.36 mg/mL）、Rg2（0.42 mg/mL）、Rb1（0.16 mg/mL）、Rc（0.3 mg/mL）、F1（0.1 mg/mL）、Rb2（0.44 mg/mL）、Rb3（0.36 mg/mL）、Rd（0.38 mg/mL）、Rg3（0.24 mg/mL）、F2（0.22 mg/mL）、CK（0.26mg/mL）的混合对照品溶液。 2.2 供试品溶液的制备

平行称取人参花茶、人参花红茶4 g 2 份，加水煎煮2 次，每次100 mL，每次2 h，煎液滤过合并，通过D101 型大孔树脂柱，上样吸附4 h。用水洗脱至无色，再用60%乙醇洗脱至无皂苷反应，收集60%乙醇洗脱液[11]，浓缩，85℃蒸干，在250 mL容量瓶中甲醇定容，0.45um针式过滤器滤过，取续滤液，即得供试品、平行供试品。 2.3 色谱条件

色谱柱：Unitary C1（8250 mm×4.6 mm，5um）；柱温：30℃；检测波长：203nm；流速：1.3mL/min；进样量：10uL；流动相：乙腈 0.05%磷酸水溶