饮料中咖啡因含量的高效液相色谱分析

浓度?g/mL 峰面积A/mV?s μV(x10,000)6.05.55.04.54.03.53.02.52.01.51.00.50.0-0.54.34.44.54.610 194576.3 20 365742.0 40 694637.3 50 949984.9 60 1084891 4.74.84.95.05.15.25.35.45.5min图一：咖啡因标准溶液峰面积-质量浓度图

咖啡因峰面积-质量浓度的标准曲线 平均峰面积（mV*S） 1200000 1000000 800000 600000 400000 200000 0 0 50 浓度（μg/ml）

y = 18142x + 4840.9 100 图二：咖啡因标准溶液峰面积-质量浓度的标准曲线

所以线性方程为：A=18142c+4840.9

3．根据试样溶液中咖啡因的峰面积值，计算可口可乐和百事可乐中咖啡因的质量浓度。

将A=219512.4代入A=18142c+4840.9得C=11.8μg/mL

c百事可乐?11.8?10mL?g/mL?118?g/mL即百事可乐中咖啡因的质量浓度

1mL为118 C=11.8μg/mL

（2）可口可乐中咖啡因的质量浓度 将A=194313.1代入得A=18142c+4840.9得C=10.4μg/mL

c可口可乐?10.4?10mL?g/mL?104?g/mL,即可口可乐中咖啡因的质量浓度

1mL为104μg/mL 七．思考题。

1.解释用反相柱（ODS）测定咖啡因的理论基础。

答：反向色谱法中流动相的极性大于固定相，利用样品中各组分在色谱柱中固定相和流动相之间分配系数或吸附系数的差异，将各组分分离后进行检测，并根据各组分的保留时间和响应值进行定性、定量分析。 2.能否用离子交换色谱柱测定咖啡因？为什么？

答：不能，因为离子交换色谱以离子交换树脂作为固定相，树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换，根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。