理化因素对离体心脏活动的影响
实验目的:1.学习离体心脏灌流法;
2.观察不同理化因素对离体心脏活动的影响。
实验原理: 静脉窦能自动产生一定节律的兴奋,是蛙心的正常起博点。在适宜的环境中失
去神经支配的离体蛙心在一定的时间内仍可产生规律的节律性兴奋和收缩活动,仍可保持对生物活性物质的反应性。离体心脏和在体心脏相似,其正常节律性活动和正常的反应性,需要一个适宜的理化环境,改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
实验对象:蟾蜍
实验药品和器材:
蛙类手术器械、蛙心插管、蛙心夹、张力换能器、试管夹、双凹夹、万能
支架、滑轮、滴管、小杯、任氏液、0.65%NaCl、2êCl2、1%KCl、3%乳酸、1:10000肾上腺素、1:100000乙酰胆碱。
实验步骤:1.离体蛙心的制备:(1)暴露心脏;(2)心脏插管;(3)心脏离体。
2.连接实验装置:(1)用试管夹夹住蛙心插管的上部并固定于支架上,将蛙心夹的
连线连接在张力换能器上;(2)将换能器的引线连接于BL-420系统的输入通道。
3.观察项目。
实验结果:
实验讨论:根据实验结果得:
1:把全部任式液换成等量0.65%NaCl溶液,心脏收缩曲线幅度明显降低。原因:心肌的收缩活动与Ca+触发的, 用065%NaCL 溶液灌蛙心,灌注液中缺乏Ca+,导致心肌动作电位2期内流Ca+减少,而Ca+的胞内浓度和心肌的收缩能力正相关,所以心肌收缩活动也减弱。
2:滴加两滴1% KCl溶液,心脏收缩曲线幅度降低。原因:(a)滴加KCl后,细胞
外钾离子浓度增加,而钾离子对Ca+的内流有竞争性抑制作用,导致内流的Ca+减少,从而引起心肌收缩活动减弱;(b)当胞外钾离子浓度增加时,膜内外钾离子浓度差减小,静息电位的绝对值减小,从而导致心肌收缩活动减弱;
3:滴加2%的氯化钙后,心脏收缩曲线幅度上升,原因:滴加氯化钙使心肌细胞外
液Ca+浓度升高,Ca+内流增多,而Ca+的胞内浓度和心肌的收缩能力正相关,所以心肌收缩活动加强。
4:滴加两滴1/10000Adr,心脏收缩曲线幅度明显上升,频率加快。原因:肾上腺
素能与心肌细胞膜上的β1受体结合,促进L型Ca+通道开放,引起正性变时、变力、变传导作用,所以心脏收缩曲线幅度明显上升频率加快。
5:滴加两滴1/100000Ach,心脏收缩曲线幅度降低。原因:乙酰胆碱能与心肌细胞
膜上的M受体结合,使L型Ca+通道被抑制,Ca+内流减少;同时,钾离子通道激活,复极时钾离子外流加速,平台期缩短,导致Ca+内流减少,从而导致心脏收缩曲线幅度降低。
6:加乳酸,心脏收缩曲线幅度降低,原因是,H+会与Ca+竞争结合肌钙蛋白,阻
碍兴奋收缩偶联,从而抑制心肌的收缩。加入NaHCO3后心脏收缩曲线幅度回升是因为它中和了H+,消除了H+对Ca+竞争抑制。
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