1.使用α-鹅膏覃碱可将真核细胞的三种RNA聚合酶区分开来。
2.原核细胞启动子-10区的序列通常被称为Pribonow box,其一致序列是TATAT。 3.tRNA基因的启动子最重要的特征是基因内启动子。
4.逆转录酶通常以tRNA为引物,具有依赖于RNA的DNA聚合酶,依赖于DNA的RNA聚合酶和RnaseH三种酶的活性,使用该酶在体外合成cDNA时常用Oligo dT为引物。 5.大肠杆菌RNasep由RNA和蛋白质组成,其中RNA能单独完成催化该酶参与的后加工。
6.原核细胞基因转录的终止有两种机制,一种是依赖于终止子,另一种是依赖于Rho因子。 7.snRNA即是小分子细胞核RNA,它的功能主要是参与Pre-mRNA的剪接。 8.snoRNA即是小分子的细胞核仁RNA,它的主要功能是参与真核细胞Pre-mRNA的后加工。
9.四膜虫Pre-mRNA的剪接需要鸟甘酸或鸟甘作为辅助因子。 二.简答
1.逆转录酶的发现和利用是现代分子生物学的革命,其重要意义在那里? 答:导致了cDNA克隆生物技术的诞生。能够由克隆的cDNA表达蛋白。 2.
三.补充概念
1.模板链:可作为模板转录为RNA的那条链,该链与转录的RNA碱基互补在转录过程中,RNA聚合酶与模板链结合,并沿着模板链的3→5方向移动,按照5→3方向催化RNA的合成。
2.启动子:在DNA分子中,RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序列。
3.内含子:在转录后的加工中,从最初的转运产物除去的内部的核苷酸序列。 SD序列:
mRNA用于结合原核生物核糖体的序列。
第十七章 蛋白质合成
一. 空填
1. 蛋白质的生物合成通常以AUG作为起始密码子,有时也以GUG作为起始密码子,以UAG、UGA、UAA作为终止密码子。 2. SD序列是指原核细胞mRNA的5‵-端富含嘌呤碱基的序列。它可以喝16s rRNA的3‵-端的嘧啶碱基序列互补配对,而帮助起始密码子的识别。 3. 无细胞翻译系统翻译出来的多肽链比在完整的细胞中翻译的产物要长,这是因为没有经历后加工。 4. SRP是指信息识别颗粒,它是一种由RNA和蛋白质组成的超分子体系,它的功能是蛋白质的分泌。
5. mRNA上编码区内密码子的突变可造成致死效应,但生物体可通过tRNA反密码子的突变而得以成活。这种tRNA 的突变被称为基因间校正,而这种tRNA称为校正tRNA。
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6. 以(UAG)n作为模板在无细胞体翻译系统中进行翻译可得到两种多肽。 7. 原核细胞内起始氨酰-tRNA为fMet-tRNA,真核细胞内起始氨酰-tRNA为Met-tRNA。
8. 基因表达包括转录和翻译。
二.简答
1.简述原核细胞核真核细胞生物蛋白质合成的主要区别。
答:原核生物蛋白质的合成与真核生物蛋白质的合成主要差别有:(1)原核生物翻译与转录是偶联的,真核生物要将细胞核内转录生成的mRNA转运到细胞质才能进行蛋白质合成,因此转录和翻译不可能偶联。(2)原核生物肽链的合成是从甲酰甲硫氨酰-tRNA开始的,真核生物肽链的合成是从甲硫氨酰-tRNA开始的(3)原核生物肽链合成的起始依赖于SD序列。真核生物肽链合成的起始依赖于帽子结构(4)原核生物的mRNA与核糖体小亚基的结合先于tRNA与小亚基的结合,而真核生物的起始tRNA与核糖体小亚基的结合先于mRNA与小亚基的结合,(5)在原核生物蛋白质合成的起始阶段,不需要消耗ATP,但真核生物需要消耗ATP(6)参与真核生物蛋白质合成起始阶段的起始因子比原核生物复杂,释放因子则相对简单(7)原核生物与真核生物在密码子的偏爱性上有所不同(8)真核细胞的翻译后加工比原核细胞复杂。 3. 简述信号肽假说的基本内容
答:分泌性蛋白质的初级产物N-端多有信号肽结构,信号肽一旦合成(蛋白质合成未终止),即被胞浆的信号肽识别蛋白(SRP)结合,SRP与内质网的内侧面的受体即对接蛋白(DP)结合,组成一个输送系统,促使膜通道开放,信号肽带动合成中的蛋白质沿通道穿过膜,信号肽在沿通道折回时被膜上的信号肽酶切除,蛋白质在内质网和高尔基体进一步修饰后,即可被分选到细胞的不同部位。
三.补充概念
1. 信号肽:常指新合成堕胎联众用于指导蛋白质跨膜转移的N-端氨基酸序列。 2. 蛋白质折叠:蛋白质的三维构象,称为蛋白质的折叠。是由蛋白质多台联的
氨基酸序列所决定的。 3. 亮氨酸拉链:这是真核生物转录调控蛋白与蛋白质及与DNA结合的基元之一。 4. 螺旋-环-螺旋:这是蛋白质基元由两性α-螺旋通过一个肽段连接形成螺旋-环-螺旋结构,两个蛋白质通过两性螺旋的疏水面相结合,与DNA的结合则依靠此基元附近的碱性氨基酸侧链基团与DNA的碱基结合而实现。 5. SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。
第十八章 基因调控
一. 简答
1. 概述原核生物基因表达调控的特点。 答:原核基因表达调控与真核生物存在很多共同之处,但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构,其基因组结构要比真核生物简单,基因表达的调控因此比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下
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三方面:(1)σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性:原核生物只有一种RNA聚合酶,核心酶催化转录的延长,亚基识别特异启动序列,即不同的因子协调启动不同基因的转录(2)操纵子模型的普遍性:除个别基因外,原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇的连续排列在染色体上,共同组成一个转录单位即操纵子。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因,在同一个启动序列控制下,转录出多顺反子mRNA。(3)阻遏蛋白和阻遏机制的普遍性:在许多原核操纵子系统中,特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时,结构基因的转录被阻遏或去阻遏。 2. 简答真核生物基因表达的调控方式. 答:(1)DNA水平的调控:a.基因丢失 b.基因扩增 c.DNA序列的重排 d.染色质结构的变化 e.DNA的修饰(2)转录水平的调控:a.染色质的活化 b.转录因子的作用 (3)转录后水平的调控:a.mRNA前体的加工 b.mRNA的选择性拼接(4)翻译水平的调控a.控制mRNA 的稳定性 b.反义RNA的作用 c.选择性翻译 d.抑制反义的起始(5)翻译后水平的调控a.多肽链的加工和折叠 b.氨基酸的重排 c.通过肽链的断裂等加工方式产生不同的活性多肽。
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