②愈伤组织的继代培养： 进行继代培养所用的培养基，和培养愈伤组织所用的培养基相同。在严格的无菌条件下(接种箱内)将愈伤组织连同原来的外植体，一起移到新的培养基上。愈伤组织的继代培养，一代为20 d。如果延长培养时间，培养基中的营养物质会减少，外植体也会分泌一些有毒物质，造成自身中毒。20 d以后，可以根据愈伤组织的大小，决定是继续进行继代培养，还是进行试管苗培养。如果愈伤组织长到直径为1～1．5 cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需要进行第二代继代培养。在愈伤组织进行继代培养期间，可以将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光。愈伤组织见光后，颜色可以转为绿色。
③试管苗的培养：当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的培养，试管苗的培养分为生芽培养和生根培养。培养一株完整的试管苗，必须先进行生芽培养，然后进行生根培养，如果顺序颠倒，先诱导生根，就不好诱导生芽了。注意，试管苗应该进行见光培养。
(5)移栽：试管苗一般在高湿、弱光、恒温下异养生长，出瓶后一定要保温、保湿。试管苗光合作用能力低，在移栽前给予较强光照闭瓶炼苗，以促进小苗向自养转化。珍珠岩为固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合做栽培的基质。
(6)栽培： 将幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗生长情况，适时浇水、施肥，直到开花。
(7)有关问题讨论：
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高二年级第二学期生物学科 总第 课时导学案 课题 植物组织培养1
使用时间： 编制人：
一、学习目标：
尝试植物组织培养，熟练掌握植物组织培养的基本技术 二、知识构成：
1．植物组织培养的依据是 。植物细胞的全能性是指 。
2．植物组织培养是指在 和 条件下，将 、 在适宜的培养条件下 、 和 的技术。
3．由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。称为 ，或者叫做 。脱分化产生的 继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做 。 植物组织培养的过程可以简要归纳为：离体的植物器官、组织或细胞(外植体) 植物体。
4． 和 是启动细胞分裂、 和 的关键激素。一般来说当 时，有利于根的分化；当 时，有利于 的分化；当 时，则促进 的生长。
5．在植物组织培养中最常用的培养基是 。 思维点拨
1．植物组织培养的依据是什么?什么叫植物细胞的全能性?
2．什么叫分化?什么叫脱分化?植物组织培养的过程包括哪几个重要步骤?
3．在植物组织培养的过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作?
4．在接种3～4 d观察外植体生长情况时，统计发现有部分外植体被污染，请分析外植体被污染的原因有哪些?
5．在植物组织培养中最常用的培养基是什么?接种时需要注意哪些问题?
三、学法和自检：
1、(多选)在制备MS固体培养基过程中I 有误的是 ( ) A．在使用提前配制的母液时，可直接用移液管从母液中取
B．配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍 C．配制培养基时，琼脂要及早加热熔化
D．MS培养基的pH要求不太严格，可控制在5～7之间
2、某同学在进行组织培养过程中，发现只分裂而不分化出芽和根，可能原因是 ( )
A．未见阳光 B．培养时间不到 C．培养基营养过多 D．细胞分裂素和生长素配比不对
14．下列关于影响植物组织培养因素，说法正确的 是 ( )
A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同 B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素
C．植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D．pH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要 13．关于愈伤组织形成过程的正确叙述是 ( )
A．是离体植物细胞分化的结果 B．是离体植物细胞分裂的结果
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C．是离体的动物细胞分化的结果 D．是离体的动物细胞分裂的结果
课题 植物组织培养1
四、达标检测
1．植物组织培养中涉及的细胞分裂方式是( )
A．无丝分裂 B．减数分裂 C．有丝分裂 D．既有有丝分裂，又有减数分裂 2．细胞的全能性是指 ( )
A．具有细胞膜、细胞质、细胞核结构的完整细胞能进行各种生理活动 B．具有细胞膜、细胞质i无纽胞核也能完成特定的生理活动 C．生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 D．具有该物种所特有的全套遗传物质的细胞 3．植物细胞组织培养是指 ( )
A．离体的植物器官组织或细胞培育成愈伤组织 B．愈伤组织培育成植株 C．离体细胞培育成植株 D．愈伤组织形成高度液泡化的组织
4．可以成为植物组织培养条件的是 ( ) ①C02 ②有机物③生长素 ④细胞分裂素 ⑤水⑥矿质元素
A．①③⑤⑥ B．②③⑤⑥ C．②③④⑤⑥ D．①②⑤⑥ 5．动物体内各种类型的细胞中，具有最高全能性的 为 ( ) A．体细胞 B．生殖细胞 C．受精卵 D．干细胞
6．在离体的植物器官或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的 ( )
A．消毒灭菌 B．适宜温度 C．充足光照 D．适宜的养料和激素
7．植物组织培养的过程是， ( ) ①离体的植物器官、组织或细胞 ②愈伤组织 ③形成根、芽④脱分化⑤再分化⑥植物体
A．①②③④⑤⑥ B．①④②⑤③⑥ C．①③④⑤②⑥ D．①④⑤②③⑥ 8．植物材料的选择直接关系到实验的成败，菊花选 材一般选择 ( ) A．未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 B．开花植株的茎上部枝条 C．开花植株上的花药 D．未开花植株的茎下部的枝条 五、学习小结和课外作业： 1、学习小结：
2、上本作业：
3、课本或资料选题： 4、补充练习：
9．制备MS固体培养基操作过程中，有误的是 ( )
A．配制母液时，无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍、 B．激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1 mg／mL质量浓度单独配成母液 C．制备1 L MS培养基时，先将母液加)k 800 mL蒸馏水中加热灭菌，再加琼脂凝固 D．分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 10．对人工种子正确的解释是 ( )
A．通过科学手段人工合成的种子 B．种皮能够自我生成
C．利用植物组织培养技术获得胚状体，再包上人造种皮获得的种子…D．人工种子发芽率低
11．植物组织培养过程中分化成的幼苗需要移栽，下列关于移栽的措施，说法错误的是 ( )
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A．移栽时，应在打开培养瓶的封口后马上移植，一B．移栽时，应先将培养瓶的封口膜打开一段时间，让试管苗在培养间生长几日 C．移栽时需用清水清洗根部的培养基 D．最后幼苗需移植到捎毒的新环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中
12．下列关于植物组织培养中植物激素使用说法， 不正确的是 ( ) A．植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素
B．先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化 C．先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化
D．同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向
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