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生物物质分离工程 2

来源:用户分享 时间:2025/6/9 13:41:13 本文由loading 分享 下载这篇文档手机版
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一、名词解释

1.全排阻:分子直径比凝胶最大孔隙直径大的, 就会全部被排阻在凝胶颗粒之外,这种情况叫全排阻。

2.分级分离:根据混合物中各组分的理化性质的差异而将其逐段分开的方法。

3.错流过滤:如果料液给过滤介质表面一个平行的大流量的冲刷,则过滤介质表面积累的滤饼就会减少到可以忽略的程度,而通过过滤介质的流速则比较小,这种过程叫错流过滤。 4.盐析沉淀:在高浓度中性盐存在下,欲分离物质在中性盐水溶液中的溶解度降低而产生沉淀的过程叫做盐析沉淀。

5.感受态细胞:处于能从周围环境中吸取DNA的生理状态的细胞。

6.反义药物:主要指反义寡核苷酸(ODNs), 即其核苷酸序列可与靶mRNA或靶DNA互补, 抑制或封闭基因的转换和表达,或诱导RnaseH 识别或切割mRNA, 使其丧失功能。 7.反萃取:用反萃取剂使被萃取物从负载有机相返回水相的过程。

8.凝胶层析:利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据分离物质的大小不同来进行分离的过程。

9.类分离:将分子量极为悬殊的两类物质分开,如蛋白质与盐类,称作类分离或组分离选择凝胶时,应使样品中大分子组的分子量大于其排阻限,而小分子组的分子量小于渗入限大分子的分配系数Kd=0,小分子的Kd=1。

10.全渗入:被分离组分的分子量小于该种凝胶的渗入限,其分子可以自由进出凝胶颗粒,这叫做全渗入。

11.反胶团萃取:是指利用两性表面活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基因自发地向内聚集而成的,内含微小水滴的空间尺度仅为纳米级的集合型胶体进行萃取的过程。

12.浓差极化现象:在电解过程中,电极附近某离子浓度由于电极反应而发生变化,本体溶液中离子扩散的速度又赶不上弥补这个变化,就导致电极附近溶液的浓度与本体溶液间有一个浓度梯度,这种浓度差别引起的电势的改变的现象称为浓差极化现象。 13.重结晶:是将晶体溶于溶剂或熔融以后,又重新从溶液或熔体中结晶的过程。 14.离子交换层析:是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。

15.分配系数:在一定温度、压力下,溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里,达到平衡后,它在两相的浓度为一常数叫分配系数。

16.色谱技术:是一种利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数,当两相作相对运动时,这些物质随流动相一起运动,并在两相间进行反复多次的分配,从而使各物质达到分离。

17.双水相萃取:利用物质在互不相溶的两水相间的分配系数的差异进行萃取的方法。

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18.树脂的再生:离子交换器所装载的离子交换树脂运行至失效后,用化学药剂将离子交换树脂所吸附的离子和其他杂质洗脱除去,使之恢复原来的组成和性能的过程称树脂的再生。 19.流动相: 流动相是指在色谱过程中载带样品或组分向前移动的那一相。

20.高效液相色谱: 是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相,借助高压泵来输送流动相,并配有实时在线检测器,实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。

21.反渗析: 当外加压力大于渗透压时,水将从溶液一侧向纯水一侧移动,此种渗透称之为反渗透。

二、填空题

1.工业萃取所需设备主要包括 混合器 、 分离器 、 回收器 三部分。 2.超临界CO2萃取工艺流程主要有 等温变压 、 等压变温 和 恒温恒压 过程。

3、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于 交联度 ,其越小,凝胶孔径 越 大 ;而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于 琼脂糖浓度 。

4.琼脂糖浓度常用的蛋白质沉析方法有 盐析 、 等电点 和 有机溶剂 。 5.超离心法是根据物质的 沉降系数 、 质量 和 形状 不同,应用强大的离心力,将混合物中各组分分离、浓缩、提纯的方法。

6.阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为 强酸型 、 弱酸型 和 中等强度 ;其典型的活性基团分别有 磺酸基团 、 羧基 和 磷酸基 。 7.反胶团的制备方法有 注入法 、 相转移法 、 溶解法 。

8.工业上常用的膜组件有 管式膜组件 、 中空纤维膜组件 、 平板式膜组件 和 螺旋卷式膜组件 。

9.结晶包括三个过程 过饱和溶液的形成 、 晶核的生成 和 晶体的生长 。 10.克服浓差极化现象的措施有 搅拌 、 震动 、 错流 、 切流 。

11.写出下列离子交换剂类型:732 强酸性阳离子交换树脂 ,717 强碱性阴离子交换树脂 ,CM-C 阳离子交换树脂(弱酸性),DEAE-C 阴离子交换树脂(弱碱性)。 12.在结晶操作中,工业上常用的起晶方法有 自然起晶法 、 次级起晶法 和 晶种起晶法 三种。

13.根据干燥曲线,物料干燥可分为 恒速 阶段和 降速 阶段两个阶段。 14.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同,可将吸附分为 物理吸附 化学吸附 和 交换吸附 吸附。

15.按照一般的习惯析出物为晶体时称为 结晶 ,析出物为无定形固体则称为 沉淀法 。 16.吸附剂按其化学结构可分为两大类:一类是有机吸附剂,如 活性炭 、 淀粉 、等;另一类是无机吸附剂,如 硅胶 、 氧化铝 等。

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三、选择题

1.“类似物容易吸附类似物”的原则, 一般非极性吸附剂适宜于从下列何种溶剂中吸附非极性物质。 ( B )

A.极性溶剂 B.非极性溶剂 C.三氯甲烷 D.溶剂

2.用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时,吸附量很低,这是因为 ( C )

A. 偶极排斥 B.离子竞争 C. 解离低 D. 其它

3.将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为: ( A )

A、亲和沉淀 B、聚合物沉淀 C、金属离子沉淀 D、盐析沉淀

4.阴离子交换剂可交换得为: ( C )

A、阴、阳离子 B、蛋白质 C、阴离子 D、阳离子

5.为了进一步检查凝胶柱的质量,通常用一种大分子的有色物质溶液过柱,常见的检查物质为蓝色葡聚糖,下面不属于它的作用的是 ( C )

A.观察柱床有无沟流 B.观察色带是否平整 C.测量流速 D.测量层析柱的外水体积

6.蛋白质分子量的测定可采用那种方法 ( D )

A、离子交换层析 B、亲和层析 C、凝胶层析 D、聚酰胺层析

7.其他条件均相同时,优先选用哪种固液分离手段 ( B )

A、离心分离 B、过滤 C、沉降 D、超滤

8.在超滤过程中,主要的推动力是 ( C )

A. 浓度差 B. 电势差 C. 压力 D. 重力

9.不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同,那种离子半径效果好 ( A ) A、小且带电荷较多的阴离子 B、大且带电荷较多的阴离子 C、小且带电荷较多的阳离子 D、大且带电荷较多的阳离子

10.其他条件均相同时,优先选用哪种固液分离手段: ( B )

A、离心分离 B、过滤 C、沉降 D、超滤

11.盐析法沉淀蛋白质的原理是: ( B )

A、降低蛋白质溶液的介电常数 B、中和电荷,破坏水膜 C、与蛋白质结合成不溶性蛋白 D、调节蛋白质溶液pH到等电点

12.过滤的透过推动力是: ( D ) A、渗透压 B、电位差 C、自由扩散 D、压力差

13.在相同的离子强度下不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同,种离子半径效果好。(啊) A、小且带电荷较多的阴离子 B、大且带电荷较多的阴离子 C、小且带电荷较多的阳离子 D、大且带电荷较多的阳离子

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14.以下各物质可用于密度梯度离心介质的是: ( D )

A、蔗糖 B、聚蔗糖 C、氯化铯 D、以上均可

15.离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂,通过那种作用力将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。 ( A )

A、静电作用 B、疏水作用 C、氢键作用 D、范德华力

16.工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀,一般先将其转变为: ( B )

A、钠型和磺酸型 B、钠型和氯型 C、铵型和磺酸型 D、铵型和氯型 17.亲和层析的洗脱过程中,在流动相中加入配基的洗脱方法称作: ( C )

A、阴性洗脱 B、剧烈洗脱 C、竞争洗脱 D、非竞争洗脱 18.超临界流体萃取中,如何降低溶质的溶解度达到分离的目的: ( C )

A、降温 B、升高压力 C、升温 D、加入夹带剂

19.表面活性剂的亲水与亲油程度的相对强弱,在工业上常用HLB数来表示。下列说法正确的是: ( B )

A、HLB数越小,亲水性越强 B、HLB数越大,亲水性越强 C、HLB数越大,亲酯性越强 D、以上说法都不对 四、问答题

1.针对分离对象而言,生物分离过程有何特点?

答:①发酵液或培养液是产物很低的水溶液 ②培养液是多组分的混合物 ③生化产品的稳定性差 ④对最终产品质量要求高。

2.差速区带离心法和等密度离心法有何区别?

答:① 在原理上,差速区带离心法依据粒子的沉降速率差异被分离,等密度离心法依据粒子本身的密度差异被分离;② 在梯度范围上,差速区带离心法介质的密度小于样品中各种粒子的密度,等密度离心法介质的密度大于待分离样品中各种粒子的密度;③ 在时间效应上,差速区带离心法长时间离心,所有待分离粒子都沉淀在管底,等密度离心法长时间离心,各粒子停留在等密度形成的区带。

3.生物分离工程的一般步骤是什么?各步骤中的单元操作主要有哪些?

答:① 发酵液的预处理与固液分离,主要操作有:加热、调节pH、沉降、过滤、错流过滤、均质化研磨、溶胞、萃取;② 初步纯化,主要步骤:沉淀、吸附、萃取、超滤;③ 高度纯化,主要步骤:层析、离子交换、亲和、疏水、吸附、电泳;④ 成品加工,主要步骤:无菌过滤、超滤、冷冻干燥、喷雾干燥、结晶。4.亲和层析的原理是什么?主要特点是什么? 答:亲和层析的设计和过程大致分为以下三步:①配基固定化:选择合适的配基与不溶性的支撑载体偶链,或共价结合成具有特异亲和性的分离介质;②吸附样品:亲和层析介质选择

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