微生物学实验报告（免费） - 图文

微 生 物 学 实 验 报 告

目录索引

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实验一 油镜的使用和细菌的简单染色法 ................................................. 2 实验二 细菌的革氏染色与芽孢染色 ..................................................... 4 实验三 常用培养基的配制 ............................................................. 6 实验四 酵母菌霉菌的形态结构观察及酵母死活细胞的鉴别 ................................. 7 实验五、微生物大小的测定与显微计数 ................................................... 9 实验六 环境中微生物的检测和分离纯化 ................................................ 10 实验七 细菌鉴定中常用的生理生化反应 ................................................ 11 实验八 （综合实验）化能异养微生物的分离与纯化 ...................................... 12

课程名称： 微生物学 实验班级：化生系生命科学本科 实验日期： 指导教师：黎勇

实验一 油镜的使用和细菌的简单染色法

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〔目的要求〕学习并熟练掌握油镜的使用技术；观察细菌的基本形态；学习观察细菌的运动性的基本方法。

〔基本原理〕

1. N·A=n·sinα 2. D=λ/2N.A

3. 目镜可提高放大倍数，但有效放大率取决于镜口率。已经分辨的物体不放大看不清，未分辨物放得再大也看不清。

4. 用悬滴法或凹玻片法观察细菌的运动性时，可以通过真运动能定向地由一处快速运动来区别于颗粒的布朗运动。

〔器材用具〕显微镜、载玻片、凹玻片、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯、凡士林、吸水纸、擦镜纸；细菌、放线菌等固定装片；培养18小时左右的B.subtilis. S.arueus菌斜面培养物；无菌水、生理盐水。

〔方法步骤〕： （一） 油镜的使用

镜检装片在中倍（或高倍镜）下找到目的物，并使位于视野正中 聚光镜上升到最高位置，虹彩光

圈开到最大，镜头转开成八字形 在玻片的镜检部位（光斑处）滴一滴香柏油 油镜转入正下方 侧视小心上升载物台（缩短镜头与装片距离，镜头浸入油中，至油圈不扩大为止镜头几与装片接触） 粗调器徐徐下降载物台（密切注视视野，当捕捉到物像时，立即用细调器校正） 仔细观察并绘图 取出装片，清洗油镜：擦镜纸拭去镜头上的香柏油 擦镜纸沾少许二甲苯擦去残留（用手指辅助，迅速拭擦一、二次） 用清洁擦镜纸仔细擦干二甲苯（2-3次）。

（二） 细菌的简单染色法：涂片 干燥 火焰固定 染色 水洗 干燥 油镜观察 （三） 细菌运动性的观察 取洁净盖玻片，四周涂上凡士林 滴加一小滴菌悬液 凹玻片的

凹窝向下盖于盖玻片上 翻转观察

〔结果分析〕

1、画一圆圈表示视野，选取所观察的微生物绘图，注意特殊结构、形状和排列。（描绘时按视野实际大小5－10倍绘制）

菌名：大肠杆菌 菌名：金黄色葡萄球菌 放大倍数：100×10（×5） 放大倍数：100×10（×5） 特殊结构：无 特殊结构：无

视野观察下微生物的形态

2、油镜使用时为什么必须干燥装片？

防止水油分层，光受到折射而影响油镜性能的发挥 〔实验讨论〕

首次实验中有几个要点：一是按无菌操作取用菌；二是涂片技术的掌握；三是油镜使用技术。凡实验

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中学生的所思所想，如无菌操作技术要点、自行处理实验材料、失败与思考等均可进行讨论（如涂片时蒸馏水不宜过多、取用菌时防止菌被灼烫变形、取菌宜少不宜多等均是可以讨论的内容）。

实验二 细菌的革氏染色与芽孢染色

〔目的要求〕观察细菌菌落的特征；掌握简单染色法、革兰氏染色法的原理及操作步骤；在油镜下观察细菌个体形态；学习环境中微生物的检查方法，并加深对微生物分布广泛性的认识

〔器材用具〕E.coli\\B.subtilis\\S.aureus.的斜面培养物（18－24小时）以及菌落平板各一个；染

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液：草酸铵结晶紫、划兰氏染液、卢戈氏碘、95%的乙醇、蕃红；无菌水、显微镜、载片、滤纸、液体石蜡是、、擦镜纸、接种环。

〔方法内容〕：

（一）实验室环境中微生物的检查

（二）革兰氏染色法 涂片固定 冷却 结晶紫染色1min 水洗 碘媒染1min 95%乙醇30-60s 水洗 番红复染2－3min 水洗 干燥 油镜镜检

（三）芽孢染色 涂片固定 孔雀绿加热染色（勿干）5min 水洗 番红复染1min 水洗 镜检

〔结果分析〕实验结果被染成紫色者即为革兰氏阳性，被染成红色者为革兰氏阴性；菌体染成红色，芽孢被染成绿色。

菌名：大肠杆菌 菌名：金黄色葡萄球菌 放大倍数：100×10（×5） 放大倍数：100×10（×5） 染色反应：红色（阴性） 染色反应：紫色（阳性）

菌名：枯草芽孢杆菌 放大倍数：100×10（×5） 染色反应：紫色（阳性）

图1 视野观察下细菌的革兰氏染色反应

芽孢（绿色）

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