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6-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工酶(5)

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聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工酶

七、 思考题:

1、 化学聚合是通过一系列的化学反应来完成聚合的过程;光聚

合是通过不同的光照刺激下来完成物质的聚合过程。

2、 不可以混合;分离缓冲液与浓缩缓冲液中都有Cl-离子在电

泳的时候Cl-离子已经进入了连接正极的缓冲液中,而连接负极的缓冲液中Cl-离子含量减少。

3、 为了不使溶液扩散,向样品液中加入等量40%的蔗糖。加入

了蔗糖的样品液能提高沉降率,增加样品比重使样品液能很好的沉降到样品孔的底部。

4、 本实验关键步骤:1)配制分离胶和浓缩胶时要按顺序加入

各组分并迅速倒入两玻璃板间,防止胶体变质凝固;2)装胶要快,太慢则形成的胶不均匀3)装分离胶后应立即加水封闭,防止氧气是胶体变质;4)拔出梳子的时候要均匀用力向上,否则容易破坏样品槽

八、 实验小结:

本实验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,分离小麦幼苗过氧化物酶同工酶,根据酶的生化反映,通过染色方法显示出酶的不同区带,以鉴定小麦幼苗过氧化物酶同工酶。通过本实验,主要掌握电泳技术的原理、方法、设计、装臵、凝胶配臵等问题,熟悉所有的操作过程,另外,对同工酶有一个感性的认识。

如图中所示,不同的蛋白质在电泳中分成不同的条带,实验结果

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