虎纹捕鸟蛛毒素-X的化学合成及其鉴定

应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相方法化学合成了虎纹捕鸟蛛毒素-X(huwentoxin-X,HWTX-X),并在含5mmol／LGSH和0.5mmol／LGSSG的0.1mol／L Tris-HCl溶液(pH8.0)中氧化复性：复性产物与天然多肽具有相同的分子质量,在反相HPLC上共洗脱,其一维核磁共振谱规则分散,表明合成多肽形成了3对二硫键和稳定的空间结构,并与天然多肽相同：此合成的多肽能专一性抑制大鼠背根神经节细

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第 1 2卷第 3期20 0 8年 9月

生命科学研究L f ce c s a c i S i n e Re e r h e

Vo .2 No3 11 .

Sp20 e. 0 8

虎纹捕鸟蛛毒素.的化学合成及其鉴定 X王婉灵，刘中华，钱万强，梁宋平(. 1中南大学药学院中国湖南长沙 4 0 0;2湖南师范大学生命科学学院， 10 8 .中国湖南长沙 4 0 8; 10 13中华人民共和国科学技术部基础研究司，国北京 10 6 ) .中 0 82

摘要：用芴甲氧羰基 ( m c应 F o )固相方法化学合成了虎纹捕鸟蛛毒素一 h w no i. X( u e t nX,H X X)并在含 5 x WT—,

m lLG H和 05m lLG S的 01 lLTi. C溶液 ( H 80中氧化复性：性产物与天然多肽具有 mo/ S . mo/ S G . no/ I H l s p .)复相同的分子质量，反相 H L在 P C上共洗脱，一维核磁共振谱规则分散，明合成多肽形成了 3对二硫键和稳其表定的空间结构，与天然多肽相同；合成的多肽能专一性抑制大鼠背根神经节细胞上 N型电压敏感钙离子并此一

通道， I 5约 4 mo/ _H X X的成功合成和鉴定为进一步研究 HWT .的结构与功能关系、其 C0 0n lL WT . XX药理学性质以及新型镇痛药物研定奠定了基础 .

关键词：纹捕鸟蛛毒素一化学合成； .电压敏感钙离子通道虎 X; N型

中图分类号： 63 Q 1 Q .; 7

文献标识码： A

文章编号：10 .8 7 2 0 )30 1-4 0 77 4 (0 80 .2 10

S n h ss n Ch r c e i a i n o y t e i a d a a t r z to f Hu n o i , a p cfc N- we t x n X S e i i

tp l g -ae li m h n e I hbt rfo t eVe o o y e Vot eg td Cacu C a n l n ii r m h n m f a ot e S i e n t o t n sh we a h p d r Or i c o u u n h

WA GWa—n LUZ ogh a, I NWa—i g, IN ogpn N nl g, I h n—u2 QA nqa LA G Sn—i i n

g( .o ee o hr c ui lSine,C nrlS u U i ri,C agh 10 1 1 lg f P amaet a c cs e t o t nv sy hn sa 4 0 8,Hu n hn;2C lg f￡ Cl c e a h e t o n,C i a .o ee o l S i cs c ne,Hua om lU i r t,C agh 10 1 u a,C ia . ai ReerhS ri,In f o eS i c e nn N r a nv sy hn sa4 0 8,H nn hn;3 B s sac ev e j f ce e ei c c nadTc n l yo RC B in 0 8 2 C ia n eh oo g fP, e i 10 6, hn ) jg

Ab t a t sr c:Hu e txn X ( w no i— HWT X) e rtxe p p ie f m h e o o h pd r Or i o tn s X.,a n u oo i e t r d o te v n m fte s ie n t co u h

h w n,w ssnh s e y sl -h s eh d wt u rnl eh oy ab n la n cd ( m cA . u e a a y tei d b o dp ae m to i f oe ym tyx cro y mio ais F o . A) z i hl Th y t e i i e r p ptd s r f l e i e s n h tc ln a e i e wa e o d d n 5 mmo l/L H a 5 GS nd 0. mmo l/L GSS a H 80 n 0. G t p . i 1

o l L T i— 1 b f .T e r fl e e t a h a l c lr weg t a h ai n .B t h to/ rsHC u f r h e od d p p i e h s t e s me mo e u a i h s t e n t e o e o h t e e d v s n h t n a ie e t e o l e C . l td i e e s— h s HP C y t e i a d n t p p i s c u d b O eu e n r v r e p a e c v d L .T e H— h NMR p cr me r o s e to t y fs nt e i HW TX. y h tc X wa d s l y d e a a e p a .A1 ho e n i a e t t h s n hei HW TX— s ip a e s p r t d e ks 1 t s i

d c td ha t e y t tc X h s a

fr d i e t a i l d i k g n h e i n i n lsr c u e wi h s ft e n t e o e I d i o o me d n i ld s f e l a e a d t r e d me so a t t r t t o e o ai n . n a d t n, c ui n u h h v it y t e i he s n h tc HW TX c u d as e e tv l n i i he N y e v la e a e ac u c nn l n r tDRG o l lo s lc i ey i h b tt - p o t g td c l i m ha e s o a X t g

c l t n I 5 v l e o 0 n l L o e h r h u c s f l s n h ss o e l wi a C 0 a u f 4 mo/ .T g t e,t e S c e su y t e i fHⅥ X. y b e p u o s h X ma e h l f lf r i v si ai g i t c u e a d f n t n r l t n h p n e t t t s u t r n u c i ea i s i . g n s r o o Ke r s y wo d:Hu n o i— s l— h s y t e i; t p o t g - a e a cu c a n l we tx n X: o i p a e s n h ss N— e v l e g t d c l i m h n e d y a

(/ ce c eerh 2 0,2 3: 1~ 1 ) r S in eR sac,0 8 1 ( )2 1 2 4 e

虎纹捕鸟蛛毒素。 (u et i X H XX X hw n x ., WT - ) on是从我国特有的毒蜘蛛虎纹捕鸟蛛( r t e n s On h t u io o收稿日期：0 80—0修回日期：0 80 .4 2 0—42; 20—7 1

hw n )粗毒中分离的一个多肽毒素.H xx u ea wT .的分子质量为 29 1 6D,其氨基酸序列为 3 . a 5

基金项目：国家自然科学基金资助项目(0 0 17 3702 )作者简介：王婉灵 (9 9)女， 16一，福建厦门人，博士研究生，主要从事多肽药物药理学研究；通讯作者：梁宋平 (9 6)男， 14 .,湖南安化人，湖南师范大学教授，士，博主要从事蛋白质化学和蛋白质组学研究，e:7 187 5 6, - all n s@h n ueue . T l

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