外植体褐变及解决措施(2)

而引起褐变。

二、褐变产生的影响因素

1.植物种类及基因型 不同的植物和不同的基因型决定了不同的褐化程度。在组织培养中，品种褐化难易可能是与该品种中多酚类物质含量的多少及多酚氧化酶（PPO）活性的差异有关。木本植物和单宁含量高的植物都容易褐变，一般木本植物比草本植物更容易发生很扁现象，如鹅掌楸、油茶等，褐变现象非常明显。

2.材料的年龄和生理状态 许多实验表明，幼龄材料酚类物质含量少，褐变现象较轻；成龄材料酚类物质含量较多，容易发生褐变。

3.取材时间和部位 由于植物体内酚类化合物含量和多酚氧化酶的活性在不同的生长季节不相同，一般在生长季节，酚类物质含量增加，多酚氧化酶的活性也逐渐增强，褐变现象回严重很多，因而一般都选在早春或秋季取材。同一外植体不同取材部位，褐变程度不同，如苹果、石竹、菊花，选择顶芽比侧芽，褐变程度低，更易成活。王异星用荔枝无菌苗不同组织的诱导试验表明，茎最容易诱导出愈伤组织，培养2周后长出浅黄色的愈伤组织；叶大部分不能产生愈伤组织或诱导出的愈伤组织中度褐变；而根极大部分不产生愈伤组织，诱导出的愈伤组织全部褐变。因此，取材时应选择褐变程度轻的部位。

4.外植体的大小 一定程度上，外植体材料越小越容易发生褐变，相对较大的材料出现褐变程度较轻。

5.外植体材料受伤程度 外植体材料受伤会加剧褐变的发生。取材时，应用锋利的器械，尽可能减少受伤面积，以减轻褐变的发生。此外，外植体表面消毒时所用的化学消毒剂及较长的灭菌时间也会加重褐变现象。

6.培养条件 温度过高或光照过强，均可加速被培养组织的褐变。

7.培养基成分 培养基成分中的无机盐、蔗糖浓度、激素水平等对褐变的程度的影响尤为重要。另外，其pH值也与褐变程度有较大关系。

三、防止外植体产生褐变的对策

适当外植体的选择

取材时应注意选择褐变程度较小的品种和部位作外植体。成年植株比幼苗褐变程度厉害，夏季材料比冬季及早春和秋季材料的褐变要严重。冬季的芽不易生

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