2012CB910500-G-植物表观遗传机制与重要调控蛋白质的功能和结构研究(17)

四、年度计划

研究内容组 范 围 内 的 ChIP-on-Chip 或 ChIP-seq 实 验 ， 分 析 ChIP-on-Chip 和 ChIP-seq 实 验 数据； 8, 继续构建突变体及将各种标签 蛋白导入相关突变体， 继续构建 表观调控因子缺失的高级突变 体； 9, 分离与富集生殖细胞与体细胞 组蛋白； 10, 利用2D nano HPLC的高分辨能 力实现组蛋白及其酶解肽段的 快速、 高效分离； 利用Orbitrap 的高分辨和高灵敏鉴定实现组 蛋白甲基化修饰的鉴定。 1, 采用活细胞成像技术， 研究上述 表观遗传重要调控蛋白质在不 同缺失突变体内的定位变化； 2, 动态追踪表观调控蛋白质及组 蛋白变体在细胞分裂过程中的 传递情况； 3, 对有相互作用的表观因子， 利用 不同荧光标记， 分析其体内的动 态相互作用； 4, 根据体外、体内功能分析，结合 课题一和课题二的分析， 对关键 结构域进行体内功能验证； 5, 用 X-射线衍射的方法解析复合 物的晶体结构； 6, 挑选功能重要的表观调控因子 作用的靶基因，进行体内验证， 并获得突变体； 7, 以 FLC 为模型， 利用所构建的表 观因子缺失的高级突变体， 建立 开花途径中表观调控蛋白质的 相互作用网络。以 SPL 为模型， 建立生殖发育途径中表观调控 蛋白质的相互作用网络； 8, 根据靶基因，寻找重要转录因 子，根据高级突变体，分析表观 调控因子之间的相互作用。 利用 酵母杂交、Pull-down 或 Co-IP

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