感受态制备
灭菌的去离子水
3.3 仪器用品
高速制冷离心机、超净台、42℃水浴、37℃培养箱、电子天平、制冰机、pH计、量筒（10mL,100mL,500mL,1000mL）烧杯（50mL,100mL,500mL,1000mL）、玻璃棒、镊子、微量移液器（1000μL，200μL）、吸头（1000μL，200μL）、1.5mL 离心管、平皿、灭菌锅及紫外分光光度仪等。
4 操作步骤
以下操作步骤要注意防止杂菌污染。
4.1
0~4℃保存菌种
↓
接种在LB,37℃250r/min,
↓
过夜菌：LB按1:30~100接种，37℃250r/min，活化培养2～3h，OD600=0.2~0.4
↓
加1.5mL菌液，放置冰上10min
↓
0~4℃，4000r/min，2min
↓
0~4℃，彻底弃上清的菌体
↓
加0.1mol/L CaCl2 0.6mL，缓和悬菌，放置冰上10min
↓
4000r/min，10min
↓
0℃彻底弃上清
↓
冰冷的0.1mol/L CaCl2 0.2mL，缓和悬菌，放置冰上待用
↓
分装在4个管中
冻融法制备农杆菌感受态（《水稻NR和NIR基因启动子的克隆及功能验证》第42页） 制备YER液体培养基，使Rif终浓度分别为50mg/l,混匀后于4℃保存
从YER平板挑取根癌农杆菌EHA105单菌落,接种于10ml YER液体培养基中，28℃，
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