膜片钳技术SOP(10)

3 打开Clampex 10.1软件。

4 在File菜单中选择Set Data File Names来建立保存数据的文件夹。

5 在Acquire菜单中选择New Protocol来编辑记录方案，然后保存。

6 在Tools菜单中选择Membrane Test，选择Bath档来监测细胞封接情况。 7 待电极入水后，将200B面板上 METER中旋钮指向VTRACK，MODE中旋钮指向TRACK，观察METER中的液晶屏，通过调整PIPETTE OFFSET将液接电位调零，即Clampex中基线为0。

8 将METER中旋钮指向VM，MODE中旋钮指向V-CLAMP开始试验。

9 在Clampex中观察，待电极与细胞封接达GΩ时，选择Patch档来监测封接。调节200B面板上PIPETTE CAPACITANCE COMPENSATION中FAST外圈的τ和内圈的MAG来补偿电极的快电容成分，SLOW外圈的τ和内圈的MAG来补偿电极的慢电容成分，即将Clampex软件中尖峰状电流尽量补成一条线。 10 待细胞破膜后，选择Clampex中Cell档监测。将200B面板上WHOLE-CELL PARAMETERS中开关指向ON，通过调整WHOLE CELL CAP旋钮和SERIES RESISTANCE旋钮来补偿细胞的慢电容成分，即将Clampex软件中尖峰状电流尽量补成一个小的矩形波。

11根据SERIES RESISTANCE旋钮的读数，调整%COMPENSATION旋钮外圈的CORRECTION，内圈的PREDICTION和LAG旋钮来进行串联电阻的补偿。 12 在Clampex中Acquire菜单下选择Record来记录全细胞电流。

13实验完毕将调整过的旋钮和开关恢复原位。

通道电流的分析根据具体的实验设计进行。基本分析内容有：

1.宏观电流的分析

宏观电流（macroscopical current）是指膜上许多通道同时开放形成的离子电流，是由许多单通道电流总和形成的。应用电压钳技术在单细胞或多细胞标本

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