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膜片钳技术SOP(12)

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典型的单通道电流(single channel current)呈一种振幅相同而持续时间不等的脉冲样变化。它有两个电导水平,即0和1,分别对应关闭和开放状态。分析平均幅度Am;平均开放概率PO;平均开放时间To;平均关闭时间Tc等。

2.2单通道电导的测定

在几个不同的钳制电位下记录膜片上单通道电流,得到单通道的I-V曲线,曲线斜率即单通道电导。I-V曲线 (电流-电压关系曲线)可反映通道的如下动力学参数:激活过程;阈电位;反转电位;整流特性。

膜片钳技术20世纪生命科学技术的两大革命之一, 这项技术提供了观察离子运动单一孔道动态变化过程,直接记录到单一孔道的电流变化,为在分子水平上了解离子跨膜运动提供了直接证明。该技术把生理学由细胞水平推进到分子水平。

主要参考文献:

[1] Neher E, Sakamann B. Single channel currents recorded from membrane of denervated frog muscle fibers [J]. Nature, 1976;260:799-802.

[2]康华光.膜片钳技术及应用[M].北京:科学出版社,2003.

[3]陈军.膜片钳实验技术[M].北京:科学出版社,2001

[4]冈田泰伸,小原正裕.膜片钳技术的原理和操作[J].日本生理学杂志,1995(56):133-145.

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