大肠杆菌O104核酸扩增(pcr-荧光探针法)试剂盒说明书
选3-15个循环的平均荧光信号为基线分析;如果有Ct<16的强阳性标本,就将此标本定为AFUMI DNA>1010 copy/ml,并将此样品从数据库中剔除,再以3-15个循环的平均荧光信号为基线再分析Ct。
(2) 对于iCycler仪器,基线一般按照自设值(2-10)即可,在实验结束后,选择PCR baseline
substract选项扣除基线值。若某些曲线出现了规则的剧烈的跳动,应视为非正常情况,将其从结果中剔除(击活select wells,将此孔彩色点去,然后选择display wells)并注意调整坐标,使所有曲线都在坐标以内。
(3) 对于lightcycler仪器,用荧光记数值F1/F2读取结果。基线设定原则以超过正常阴性对
照扩增曲线的最高点,且Ct值不出现任何数值为准(一般在0.001-0.05范围内)。
2. 阈值的设定
应在扩增曲线的指数增长期内且高于阴性对照品的扩增曲线最高点,推荐将阈值设定在指数增长期和线性期的拐点处。
1. 实验前请仔细阅读本说明书。 2. 本试剂盒不做临床诊断。
3. 实验室管理应严格按照PCR基因扩增实验室的管理规范,试验人员必须进行专业培
训,实验过程中严格分区进行(试剂准备区、样本制备区、扩增和产物分析区),实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备,各区用品不能交叉使用。 4. 对每次实验进行质量控制。
5. 试剂使用前要完全解冻,并混合均匀,但应避免反复冻融,探针应避光保存。 6. 所有检测样品应视为具有传染性物质,操作和处理均需符合相关法规要求:卫生部《微
生物生物医学实验室生物安全通用准则》和《医疗废物管理条例》。
【保存条件】
1.本试剂盒于-20℃保存。
2.PCR反应液应避免反复冻融。
【有效期】
有效期为6个月。
【生产企业】
天津生物芯片技术有限责任公司
地址:天津经济技术开发区宏达街23号一区 邮编:300457
网址: 电话:(022)66229538 传真:(022)66229596
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