紫云英根瘤菌的分离与鉴定(11)

５３０

福建农业学报

第２７卷

裹４水培法验证菌株与紫云英品种间的配对

Ｔａｂｌｅ４

Ｅｘａｍｉｎｅｔｈｅｎｏｄｕｌａｔｉｏｎｂｙ

ｗａｔｅｒｃｕｌｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄ

菌株ｎ船

闽紫６号８０４１０４１１闽紫７号闽紫１号闽紫５号

矾聊

一酬

乏；恝ｍｍ

㈣

图５

Ｆｉｇ．５

吣啪邮哦邮邮邮狮邮邮邮

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ＧＺ接种闽紫ｌ号

Ｍｉｎｌｂｙａｇａｒｍｅｔｈｏｄ

ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆＧＺａｎｄ

注：试管１，２为无结瘤植株；试管３～５为结瘤植株。

３

讨论

３．１从福建永泰、闽清和蒲城等地采集的紫云英根瘤中分离获得的１８株根瘤菌，均为革兰氏阴性短杆菌，经过形态、生理生化等初步细菌学鉴定，除Ｍ３、Ｍ１０外，均为水泡状菌体，具备一般根瘤菌的特征。在后期进行的１６ＳｒＤＮＡ鉴定中，确定了ＹＸ、Ｚ３、ＧＺ、ＺＫｌ为中慢生根瘤菌属Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ，Ｂ３、Ｍ６、ＸＺ与百脉根中生根瘤菌Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｌｏｔｉ可能为同一菌种的不同变种；ＺＬＨ２为黄单孢菌属Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ菌株；Ｍ３、Ｍ１０、ＺＫ７、Ｂ４、Ｂ７、ＺＱＨ为土壤杆菌属Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ菌株；Ｂ６、Ｂ５、Ｂ１、Ｚ１为根瘤菌属Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ菌株。鉴定结果表明，所筛选菌株除ＺＬＨ２外分别属于所报道的前３个属，后期的水堵法试验也间接验证了归属于土壤杆菌属Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ的Ｂ４、Ｂ７和归属于根瘤菌属

图６

Ｆｉｇ．６

左侧结瘤试管放大

ｔｏ

Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ的Ｂｌ、Ｂ５、Ｂ６都能与紫云英结瘤，这

ｅｎｌａｒｇｅｏｆ

ＩｈｅｐｉｃｔｕｒｅｉｓｔｈｅＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｍａｐｌｅｆｔｔｎｂｅ

与Ｊｏｒｄａｎｄ［１４］对根瘤菌进行的分类结果一致。ＺＬＨ２虽与黄单孢菌属的好几个菌种相似性达到９６％，但至今尚未有该属菌株的共生结瘤报道，水培试验也无结瘤表现，究其原因，可能是受环境条件限制，也可能是其专一性比较高，能使之共生结瘤的紫云英品种较少，因此还有待进一步验证。

从上述紫云英根瘤分离得到的菌株多样性说明，紫云英除了能与互惠种族结瘤固氮外，还有其他细菌的参与，国内外的科学家对此进行了大量的研究，他们从植株根瘤中分离到多种具有固氮功能的微生物，进行分类鉴定，并对它们的生理功能，

２．４．２

水培法比较不同根瘤茵对不同紫云英品种

从表４可以看出，在水培法下，各

匹配的影响

菌株与紫云英品种的匹配性能出现了比琼脂试管培养法更大的差异。ＧＺ和ＸＺ能使供试的紫云英品种结瘤（８０４１０４１１除外），其余的根瘤菌菌株与紫云英品种问都未表现出结瘤现象，结瘤率均为０。虽然ＧＺ和ＸＺ具有广谱性，但二者还是有所差异的，如ＧＺ不能使８０４１０４１１匹配结瘤。

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