百合的组织培养技术综述(6)

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为粉红色、株矮,可供盆栽,花粉不育。后者杂种F1花色淡粉红,诱导成多倍体后花粉可育。412　花药培养与单倍体育种

在百合的花药培养方面,最早获得成功的是Sharp等[22],他们用麝香百合的花药培养获得了单

倍体植株,在N6培养基上,冷处理过的麝香百合早、中期单核小孢子经过暗培养均产生了愈伤组织,其中单倍体和二倍体细胞均有。在亚洲百合杂种系‘ConnecticutKing’的花粉培养中,1716%的中、晚期单核小孢子也产生了愈伤组织,根尖染色体鉴定表明有5/11为单倍体植株。为了得到纯粹的配子体起源的愈伤组织,CPRO-DLO离体培养亚洲百合杂种系品种‘Whilito’的花粉粒,诱导出了多核小孢子的雄核发育[51]存在着基因型差异,4个亚洲百合1、1个东方百[24]。

,百合的组织培养技术已较成,、遗传转化中广泛使用[52,53]。目前我们正在开展百合的转基因研究,将抗干旱、抗盐碱基因导入百合,旨在获得抗干旱、抗盐碱的转基因百合。

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3　百合种质资源离体保存

百合离体保存包括冷冻保存和低温贮藏两种方

法。中国农业科学院作物品种资源所将诱导出的115～210cm高的组培苗转入16～18℃、光照1000lx、8h的低温种质库冷冻保存,结果表明附加2%甘露醇的MS培养基离体保存百合种质效果最好,一年后的存活率高达9219%[47]。CPRO-DLO(荷兰农科院植物育种繁殖研究中心)将百合活体在-2℃条件下贮存了3年,仍未丧失活力[48]。

4　411　,由于百合不同种之间的杂交为远缘杂交,常有杂种胚发育不良或中途败育现象,为防止杂交胚与母体胚乳间的不亲和性,克服受精后的障碍,可以利用百合幼胚进行离体培养。在百合幼胚离体培养中,6-BA对胚真叶的分化有抑制作用[15]。王亚斌等[49]利用百合品种间杂交获得的胚龄为30～50d的种胚进行组织培养研究发现,pH值对百合幼胚的萌发及成苗有一定的影响,以pH值510为最好;培养基中加入氨基酸的幼胚萌发率及苗生长情况均比对照好,排列顺序为:谷氨酰胺>肌醇>谷氨酸>水解酪蛋白>水解乳蛋白>对照,其中加入肌醇的培养基萌发率为93175%,加入谷氨酰胺的培养基苗分生好,苗生长状况最好。加入维生素类物质和加入活性炭对胚的影响不大。授粉后35d胚龄的铁炮百合幼胚,当培养基中蔗糖含量为6%～8%时,最有利于它的胚性生长;在其愈伤组织的诱导中,2,4-D、NAA、BA都可以诱导愈伤组织的产生,但以011mg L-1NAA和110的BA单独或混合使用,诱导的愈伤组织分化不定芽的频率较高[28]。

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