百合的组织培养技术综述

组培经典3

78湖北农业科学　HUBEI　AGRICULTURAL　SCIENCES　No11,2004

文章编号:0439-8114(2004)01-0078-05

百合的组织培养技术综述

蒋细旺1,司怀军2

(11江汉大学医学与生命科学学院,湖北武汉　430056;21甘肃农业大学农学院,甘肃兰州　730070)

摘要:对20世纪90年代以后的百合组织培养技术进行了综述,包括百合外植体的准备、百合的快速繁殖技术等。还对百合种质资源离体保存和百合的组织培养技术在百合育种中的应用作了论述。关键词:百合;组织培养;育种

中图分类号:S68211;Q94311;Q81311+2　　　　文献标识码:A

　　百合(Lilium.spp)是全世界著名的观赏花卉之

一。中国是世界百合种质资源的分布中心,约有47个种、18个变种,占世界百合属总数的一半以上。其中36个种、15个变种是我国特有的珍稀种类[1]。百合除具有观赏价值外,大多数可以食用、药用,是上等的滋补佳品。但由于人类、非人类的影响,使一些分布地区窄或生态适应性弱的百合种的生存受到严重威胁球、分珠芽鳞片扦插、繁殖,,常造成种性退化,,量。,能够迅速去除病毒和更新品种,加快了百合的快速繁殖速度,缩短了百合的生育周期。在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性,而组织培养中的胚培养、花药培养等技术则可克服这些弊端。自1957年Robb[2]首次发表了百合的组织培养文章后,到现在

百合诱导分化的能力依次为种子>鳞片>花丝>花瓣>叶片。112　外植体灭菌

常用的药剂有乙醇、升汞次氯酸钠及漂白粉等。,使用浓度75～60s。升汞的1灭菌时间为10min左2010g L-1的次氯酸钠溶液浸泡min,灭菌时要不断摇动[9,10];漂白粉的使用浓度为饱和溶液,灭菌时间为10～20min[11,12]。材料灭菌后再用无菌水冲洗5次左右。另外也有将2种灭菌剂同时使用的,如先用1%次氯酸钠溶液浸泡6min,取出后放入011%升汞溶液中浸泡8min,无菌水冲洗6～7次[13]。

2　百合良种的快速繁殖

211　百合快速繁殖的途径与特点

成功的百合组织培养方法已有40多种[3]。本文将

20世纪90年代以来百合的组织培养研究现状并结合我们的一些经验进行综述。

1　外植体的准备

111　外植体的选择

利用植物组织培养技术进行百合快速繁殖时,

常通过5种途径诱导分化产生小植株。第一是器官型,即通过腋芽发育和不定芽的产生、形成丛生芽块的过程[14～16]。第二是器官发生型,即外植体脱分化形成愈伤组织再分化出器官的方式[4,17,18]。第三是胚状体发生型,即外植体按胚胎发生方式形成胚状体或先形成愈伤组织、再经愈伤组织形成胚状体再生植株的过程[16,19]。第四是鳞茎型,即鳞片近轴面或在边缘直接形成带根的小鳞茎[20,21]。第五是孢子型,即用成熟或未成熟的孢子进行培养。它包括花药培养和花粉培养[22～24](表1)。212　百合无病毒苗的培养

百合主要靠小鳞茎进行分株繁殖,但长期的营养繁殖,使得病毒积累日趋严重,造成百合生长发育不良和品种退化。已报道的14种百合病毒病中,LSV(百合潜隐病毒,Lilysymtomlessvirus)、LMV

百合的许多器官、组织都可作为外植体,如鳞

片、根尖、叶片、子房、种子、花梗、花瓣、珠芽、花柱、花丝、花药、胚、腋芽、芽尖等。用百合鳞片作外植体比较多,但不同部位的鳞片对分化有差异,王刚等[4]认为兰州百合鳞片产生芽的能力从强到弱依次为外层、中层、内层。外植体在培养基上的不同放置方式对百合鳞片的诱导也有影响,其诱导出芽能力的从强到弱依次为:鳞片内侧向上平放>鳞片竖直插入>鳞片内侧向下平放[5]。不同外植体诱导分化的能力也不同,罗凤霞等[6]研究认为,新铁炮

收稿日期:2003-11-12

作者简介:蒋细旺(1964～),男,湖北黄陂人,博士,副教授1

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