3. 生产工艺的研究与设计
3.1工艺对比选择
三种常用的菠萝蛋白酶提取工艺
酶的分离提取一直沿用离子交换吸附,冷丙酮,酒精,无机盐沉淀等方法。
国内外很早就对菠萝蛋白酶进行研究,从发展过程来看,菠萝蛋白酶的提取方法有高岭土吸附法、单宁沉淀法和超滤有机溶剂提取法,各种方法比较如下:
1.高岭土吸附法
压榨 高岭土吸附 洗脱.压滤 盐析
菠萝下脚料 汁液 吸附物 洗脱液 盐析物
离心 溶解.过滤 沉淀 干燥
湿粗酶饼 澄清液 湿酶 精品
高岭土吸附法提取菠萝蛋白酶的主要工艺操作包括:
①压榨。将菠萝下脚料洗净,用压榨机压出汁液,加入 0.05 %苯甲酸钠防
腐,迅速过滤除杂质。
②吸附。将汁液移入吸附槽中搅拌,同时加入 5 %的高岭土,搅拌约 20 min,
在 10 ℃吸附30~60 min,用虹吸排掉上清液收集高岭土吸附物。
③洗脱。用16 %的 NaOH 溶液调节吸附物的 pH 值至 7.0 左右,再加入
吸附质量为 7~9 %的食盐,搅拌 30 min,进行洗脱,然后迅速压滤,收集滤液。
④盐析。将压滤液收集在盐析槽中,用 1:3的盐酸调节 pH 值至 5.0 左右,
搅拌加入压滤液质量 25 %的硫酸铵,待完全溶解后,4 ℃下存放过夜;然后离心,收集沉淀盐析物,即粗酶。
⑤溶解。将粗酶放入溶解罐中,加入 10 倍水,用 NaOH 溶液调 pH 值至
7.0~7.5,搅拌使其溶解,过滤除杂,收集滤液。
⑥沉淀、干燥。在搅拌下用 1:3 的盐酸调节上述滤液的 pH 值至 4.0,静置
1h 使酶析出,用离心机分离出沉淀物,冷冻真空干燥或减压干燥即得菠萝蛋白酶精品。
高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂,原材料消耗多,所需设备也多,
酶活总回收率低,但产品质量较好,纯度较高,产品酶活可达4.0×106u/g 上
2.单宁沉淀
压榨 去杂质 加稳定剂 加单宁 菠萝下脚料 汁液 澄清液 稳定液
洗脱 干燥
单宁沉淀 滤液 酶制品
单宁沉淀法生产工艺流程图。
操作要点:
①压榨。将菠萝下脚料洗净,用压榨机压出汁液,加入0.005%苯甲酸钠防腐,迅速过滤除杂质。
②去杂质。鲜菠萝汁经过滤去杂。
③加稳定剂。将澄清液移入生产罐中,在搅拌条件下,加入澄清液体积0.005%
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