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纤维素酶酶活的测定方法(2)

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—!E—

中国饲料!..!年第#:期

($%)、冰醋酸($%)、甲苯!"#"#试剂醋酸钠

($%)、氢氧化钠($%)、酒石酸钾钠($%)、苯酚($%)、亚硫酸钠($%)、($%)、&,’(二硝基水杨酸新华’号滤纸(剪成#)*+&)*纸条)。!"#"!仪器同,-,法。!"#"&

试剂配制

!"#"&"#."#*/012345"6醋酸—醋酸钠缓冲液准确称取醋酸钠(,4&,7789 &4!7)6":.;和冰醋酸!"6.*2,以蒸馏水溶解,定容至#...*2。其他操作吸取5*2蒸馏水代替5*2酶液,

同样品测定作空白测定。!"5

结果计算滤纸酶活力(BC)D

C+@

!5>5.=*;1;

+#’

式中:——从标准曲线上查得的净葡萄糖C—

5毫克数(*;);————’*2反@—

——吸取#*2酶解液进行应液中含5*2酶液;#—!"#"&"!&,’(二硝基水杨酸显色液配制同

,-,法。!"!

标准曲线绘制

同,-,法。

!"&测定方法酶液制备同,-,法。样品测定方法为:准确吸取5*2酶液和#*2缓冲液于试管中,加入新华’号滤纸条一条,滴入甲苯!<&滴防腐,5.=静止反应!5>。吸取滤纸酶解液#*2,加蒸馏水#"’*2、&,’(二硝基水杨酸溶液

!"’*2于试管中,

沸水浴煮沸’*?@,冷却后在’&.@*处比色测定光密度7A值。

万方数据

测定。&

讨论

作为底物的羧甲基纤维素钠,用不同厂家生产的滤纸测定酶活时,结果不尽相同,有时相差还较大。因此,得出酶活力结论时应注明底物产地。

纤维素酶是一种微生物活性制剂,对温度、酸碱度十分敏感,不同菌株生产的纤维素酶最适34值、最佳作用温度有所不同,测定方法有待进一步探讨。

[通讯地址:郑州市花园路!E号,邮编:

5’...E]

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