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谷子肌动蛋白基因的克隆及序列分析

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以谷子(Setaria italica)为材料,提取总RNA。根据植物肌动蛋白基因编码区的两端的保守序列设计了简并引物,用5'RACE方法扩增出了谷子肌动蛋白基因编码区序列。以豌豆肌动蛋白cDNA作探针进行的Southern杂交分析表明扩增出了目的基因。将所获得的片段克隆到T载体后进行测序,

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摘要

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"谷子肌动蛋白基因的克隆及序列分析!李园莉!江元清!赵武玲"阎隆飞北京!"""#$)(中国农业大学生物学院,植物生理学与生物化学国家重点实验室以谷子(!"#$%&$&#$’&($)为材料,提取总%&’。根据植物肌动蛋白基因编码区的两端的保守序列设计了简并引物,用(’%’)*方法扩增出了谷子肌动蛋白基因编码区序列。以豌豆肌动蛋白+,&’作探针进行的-./01234杂交分析表明扩增出了目的基因。将所获得的片段克隆到5载体后进行测序,序列分析结果表明:谷子肌动蛋白基因的编码区长!!6!个核苷酸,编码了677个氨基酸;所得序列(命名为89’+)与:24;<4=中注册的肌动蛋白基因序列的相似性均在>"?以上,与其它肌动蛋白氨基酸序列的相似性达@#?以上。根据高等植物肌动蛋白序列相似性重建了进化树,表明谷子肌动蛋白与水稻肌动蛋白异型体%’+A和%’+6之间的亲缘关系最为密切,在进化过程中分化时间最为接近。分子进化谷子,肌动蛋白基因,快速扩增+,&’末端,!"#$%$&’$()*+,*$-*.$’"/0%0#1.-2%$3*$*14#56%""*2(!"#$%&$&#$’&($)B9C/<4DBEF9’&:C/<4DGE4HIJ’KL/DBE4HC*&B/4HDM2E()*’’"+"*,-&*’*+&($’!(&".("/,)0&.$1+%&(2’#2%$’3.&4"%/&#5;!#$#"6"57$8*%$#*%5*,9’$.#905/&*’*+5:-&*(0";&/#%5,;2ENE4H!"""#$).7024’-25.0<O%&’P<QEQ.O<02RS3.TTEOO20(!"#$%&$&#$’&($;2</UV)Q22ROE4HQV,2H2423<02W3ET23Q.S<+0E4Q’+.RE4H32HE.4P232R2QEH42R<4R(’%’)*02+14EX/2P<Q2TWO.Y2R0..Z0<E4012<+0E4+,&’.S!"#$%&$&#$’&($V-./01234ZO.00E4H<4<OYQEQPE01W3.Z2S3.TW2<024R3EO<+0E4H242+.RDE4H32HE.4Q1.PQ01<001232EQ<1EH1QETEO<3E0YZ20P224012<+0E4.S!"#$%&$&#$’&($<4RW2<V512W/D0<0EU2<+0E4H242P<QQ2X/24+2R<S023+O.4E4HE40.W:*8D5U2+0.3<4RQ2X/24+E4H32Q/O032U2<O2R01<0E0+.40<E4Q<4.W2432<RE4HS3<T2.S!!6!ZW,24+.RE4H<W3.02E4.S677<TE4.<+ERQV-ETEO<3E0Y+.TW<3EQ.4PE01.0123<+0E4H242Q2X/24+2QE4012:24;<4=Q1.PQ01<0E0Q1<32Q.U23>"?4/D+O2.0ER2Q2X/24+2QETEO<3E0Y<4R.U23@#?<TE4.<+ERQ2X/24+2QETEO<3E0YPE01.0123<+0E4QV512W1YO.H2420E+032232+.4Q03/+02R.4012Z<Q2.S<TE4.<+ERQ2X/24+2QQ/HH2Q0Q01<001232O<0E.4Q1EW(%’+A,%’+6)EQT.Q0E40ET<02<4R012YTEH101<U2REU23H2R<0Z20P224TEOO20<+0E4<4R3E+2<+0E4Q012Q<T20ET2V8*/9#4(0!"#$%&$&#$’&($,’+0E4H242,(’%’)*,8.O2+/O<32U.O/0E.4肌动蛋白是在真核生物中普遍存在的一种古老的蛋白质,是构成细胞骨架和肌肉肌小节的主要成分,执行着重要的生理功能,如细胞分裂、细胞运动、细胞形状变化、内吞作国家自然科学基金资助(&.V6#77""(A,,本文序列在:24;<4=中的检索号为’MA@@AA>。6#76"A@",6#@7""77)同等贡献。通讯联系人。’/01.3S.3+.332QW.4R24+2V52O:"!"D>A@#A>7A。

作者简介:李园莉,女,理学硕士,现为中科院微生物研究所读博士生。江元清,男,理学硕士,现在北A@岁,A7岁,

京农业生物技术研究中心工作。赵武玲,女,副教授,主要从事植物肌动蛋白基因的克隆、差异表达以及调控方面的研究。

收稿日期:接受日期:责任编辑:刘晖A""!D"7D"6A""AD"6D"@

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