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198例胃癌手术标本Her-2蛋白表达与临床病理的相关性和靶向治疗(4)

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型(intestinaltype)和弥漫型胃癌(diffusetype)两

类L9J。采用AJCC第6版的分类方法进行TNM分期评估和临床分期评估‘1

0|。

1.2组织芯片的构建

采用组织芯片(tissuemicroarray,TMA)¥q/(F仪(上海芯超公司制作),每例癌组织选2点,另选其中89例正常胃黏膜l点作对照组。1.3免疫组织化学染色

采用Ventana全自动免疫组织化学仪(BenchMarker)进行免疫组织化学染色。实验按产品说明书操作。选择Her一2蛋白表达阳性(+++1和阴性的乳腺浸润性癌分别作为阳性和阴性对照组。正常胃黏膜上皮表达情况作正常对照。步骤:(1)脱蜡5min×5次;(2)抗原修复,

pH=6.0,37℃,30

min;(3)滴加一抗,37℃.

32

min;(4)滴]Jn--抗,37℃,30min;(5)DAB

显色8rain;(6)苏木精复染细胞核;(7)常规梯

度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。一抗:Her一2为即用型鼠抗人Her一2单抗,克隆号485(美国罗氏公司牛产1。

1.4

Her一2免疫组织化学标记评判标准

Her一2定位于细胞膜。强度标准采用

Hofmann评判法[8J:免疫组织化学阴性(O):不染色或<10%的细胞膜染色;免疫组织化学阴性(1+):>10%的细胞膜染色较浅或仅有部

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