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活体动物体内生物发光和荧光成像技术(13)

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图11-7 左侧为Berthold Centro LB 960,右侧为Berthold TwinkleTM LB 970

3. 活体成像

首先麻醉实验动物,可采用异氟烷(isoflurane)或克他命/甲苯噻嗪(ketamine/xylazine)混合液麻醉实验动物。如果采用气体麻醉,可先注射底物。气体麻醉的优点是动物可以很快进入麻醉状态,一旦停止麻醉气体供应,动物会在几分钟内苏醒。

对于生物发光实验来说,接着注射底物荧光素。最佳的检测时间是在注射后15到35分钟之间。但需要注意的是,对于不同的动物模型,发光动力学过程并不完全一致,最好先进行预实验确定何时发光信号最强。

成像,对于生物发光来说,检测时间一般是1分钟到5分钟,如果信号特别弱,也可以延长到10分钟,如果信号特别强,也可在1分钟以内。对于荧光来说,检测时间是1秒以内。为节约时间,检测生物发光,最多可同时检测5只小鼠。对于荧光实验,麻醉好就可以马上检测。由于激发光照射的角度会影响检测的信号值,所以荧光实验建议每次只检测1只动物。

参考文献

1. Grassi R, Cavaliere C, Cozzolino S et al.Small animal imaging facility: new perspectives for the radiologist, Radiol med, 2009;114:152–167

2.Weissleder R, Pittet MJ. Imaging in the era of molecular oncology. Nature.2008;452(7187):580-589.

3. Laurent A. Bentolila, Yuval Ebenstein, Shimon Weiss. Quantum Dots for In Vivo Small-Animal

Imaging,Journal of Nuclear ,2009;50(4):493-496

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