组织培养复习大纲(2)

⑶根据培养基的配方、母液扩大倍数及需要配制的培养基体积计算所需各种母液及其他附加物的量。（4）具体操作如下：⑴取规定数量的糖源和凝固剂置于烧杯或搪瓷锅内，加蒸馏水加热使之溶解，并不断搅拌；⑵根据计算所需量依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液及其他特殊的附加物，搅拌均匀；⑶加水定容至规定体积，搅拌均匀；⑷调整培养基的pH值；⑸分装；⑹封口。

3）常见植物激素的种类及作用：1.生长素类：IAA（吲哚乙酸）、IBA（吲哚丁酸）、NAA（萘乙酸）、2，4-D （主要促进细胞伸长生长和细胞分裂，诱导形成愈伤组织，促进生根）；2.细胞分裂类：KT（激动素）、6-BA（苄基嘌呤）等（促进细胞分裂和扩大，促进茎增粗，抑制茎伸长；诱导芽的分化、促进侧芽萌发；延缓衰老）；3.赤霉素类：GA3、GA4等（可以诱导离体成花；打破休眠等功能）；4.脱落酸：ABA（促进休眠、衰老和脱落）；5.乙烯：ETH（主要促进衰老和脱落）。

第三章第四章

基本概念：

1、细胞全能性：植物体的每个生活细胞都具有该植物体的全部遗传信息，在特定的离体培养条件下，具有发育成完整植株的潜在能力。

2、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。

3、分化：指个体发育过程中，不同部位的细胞形态结构和生理功能发生改变，形成不同组织或器官。

4、脱分化：指离体条件下生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生能力，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程。

5、再分化：由脱分化形成的愈伤组织重新分化出特定细胞、组织和器官的过程。

6、器官发生途径：植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成根、芽、茎等器官的过程。器官发生的过程（途径）分为两种：1、经过愈伤组织的器官发生2、不经过愈伤组织的器官发生

7、体细胞胚胎发生途径：植物离体培养的细胞、组织、器官产生类似胚的结构，其形成也经历一个类似合子胚胎发生和发育过程，这种现象称为植物体细胞胚胎发生，形成的类似胚的结构称为体细胞胚或胚状体。途径：1.直接途径：指从外植体某些部位的胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎2.间接途径：外植体先脱分化形成愈伤组织，再由愈伤组织的某些细胞重新“决定”为胚性细胞，进而分化出体细胞胚胎。

8、愈伤组织：离体条件下生长的细胞、组织或器官经过脱分化形成的一团薄壁细胞。

9、人工种子：是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。作为繁殖材料。

10、褐化现象：褐变——是指外植体在培养过程，自身组织从表面向培养基释放出褐色物质，以致培养基逐渐变成褐色，外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。

11、玻璃化现象：是指组培苗出现叶、嫩梢呈水晶透明或半透明，植株矮小肿胀，失绿，叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎；叶表皮缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具有栅栏组织，仅有海绵组织；体内含水量高，但干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和木质素含量低的现象。

12、如何进行无菌操作接种外植体

⑴消毒，更换实验服、帽子与鞋子，进入接种室。⑵打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯，照射40min左右，后关闭。⑶开启过滤室风机，使无菌风吹拂工作台面和四周的台壁。⑷用70%—75%的酒精擦拭工作台和双手⑸用沾有70%—75%酒精的纱布擦拭盛培养基的培养器皿，放进工作台。⑹把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95%的酒精中，再在火焰上消毒，放在器械架上。⑺在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。⑻打开瓶

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