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质粒与载体(7)

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质粒与载体

基因或其它原核基因时,所考虑的第一个中间宿主总是大肠杆菌。在我们已经完成大肠杆菌中的基因选殖、鉴定及定序等工作后,选殖的基因总要送回原来的生物细胞或生物体中才有意义。然而绝大多数的大肠杆菌载体是无法在其它生物细胞中生存的。为了克服这种困难,于是人们纷纷切下包括动、植物及其它各种原核生物的质粒复制原、病毒复制原、染色体复制原,甚至染色体的部分DNA ,将之插入大肠杆菌载体中。再配上其它适当的启动子,如此构筑成的载体不但可以用来转形大肠杆菌以外的细胞并且可以在这些细胞中做适当的基因表达。这一类能穿梭于两种不同生物细胞之间的载体便称为穿梭载体(shuttle vectors)。

九、载体的适当利用

载体的种类繁多,厂商能够提供的及研究室或研究个人能够提供不计其数。当你需要利用载体时,你必须清楚你的目的。载体与宿主的搭配也非常重要,必须了解它们的特性与基因标示才能得心应手的运用。最后,也提供一些常用的质粒、载体与宿主来源:

机构:

ATCC:

CABRI:

CGSC/Yale University: http://cgsc.biology.yale.edu

DSMZ: http://www.dsmz.de

National Institute of Genetics/Japan: b.nig.ac.jp

食工所生物资源保存及研究中心: .tw/ch-home.htm

厂商:

Clontech:

Fermentas:

New England Biolabs:

N
ovagen:

Promega:

Roche:

Stratagen:


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