紫外分光光度法检测规程
测定的大部分品种,可以使用2nm缝宽,但对某些品种如青霉素钾及钠的吸收度检查则用1nm缝宽或更窄,否则其264nm的吸收度会偏低。
5.6.8. 测定时除另有规定外,应在规定的吸收峰±2nm处,再测几点的吸收度,以
核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度最大的波长作为测定波长。除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的波长±1nm以内,否则应考虑试样的同一性、纯度以及仪器波长的准确度。
结果计算:
5.7.1. 对照品比较法:可根据供试品溶液及对照品溶液的吸收度与对照品溶液的浓度以正比法算出供试品溶液的浓度,再计算含量。
A样:A对=C样:C对
C样=A样/A对×C对
式中:A为吸收度值;C为测试液浓度(以mg/ml计)。
1% 5.7.2. 吸收系数法:中国药典规定的吸收系数,系指E1,即在指定波长时,光路长度cm
1%为1cm,试样浓度换算为1%(g/ml)时的吸收度值,故应先求出被测样品的E1值比较,可cm
计算出供试样品的含量。
A
1% E1(样品)=——— cm
C L
式中:A为供试品溶液测得的吸收度值;
C为供试品溶液的百分浓度,即100ml中所含溶质的克数;
L为吸收池的光路长度(cm);
1%E1(样品) cm
供试品的含量%= ×100%
E1%
(标准)1cm
1% 式中:E1(样品)为根据前式计算出的供试品的百分吸收系数; cm
1% E1(标准)为药典或标准中规定的百分吸收系数。 cm
5.8. 吸收系数测定法:本法主要用于新品种的吸收系数测定。
5.8.1. 测定方法:取精制样品,精密称取一定量,使样品溶液配成吸收度读数在0.6—0.8之间,置1cm吸收池中,在规定波长处按5.6.8.项的规定测出读数,然后再用同批溶剂将其稀释1倍,使吸收度在0.3—0.4之间,再按上述方法测定。样品应同时测定2份,同一台仪器测定的2份间相对误差应不超过±0.5%,否则应重测。测定时先按仪器正常灵敏度测试,
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