植物总RNA的提取及RT-PCR(3)

生物学实验技术

外灯下观察结果。

五、注意事项

1．在研磨过程中，利用液氮时刻使组织保持冰冻状态。

2．RNA酶是一类生物活性非常稳定的酶类，除了细胞内源RNA酶外，外界环境中均存在RNA酶，所以操作时应戴手套。

3. 使用DEPC时，应在通风橱中戴手套操作。

4．RNA提取用品准备：

1）普通的玻璃器皿：180℃烘干8小时（玻璃），研钵，小勺，试剂瓶若干个。

2）一次性使用的塑料制品：枪头、EP管等先用DEPC水处理然后高压灭菌，烘干。

3）电泳槽：去污剂洗干净，水冲洗，3%H2O，0.1%DEPC水彻底冲洗。

4）用烘烤过的药勺称取试剂。

5）用DEPC水配制试剂：0.1%DEPC水：37℃至少处理12小时，高压灭菌15min。

6）含有Tris一类的缓冲液，不可用DEPC处理。

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